茶葉提取物及納米EGCG對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞生長增殖的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)茶葉提取物:茶多酚、EGCG、茶氨酸、咖啡堿、茶黃素、茶色素等對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的體外影響實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行篩選，選取EGCG進(jìn)一步研究，制備EGCG納米粒子。將所制備的幾種納米粒子再對(duì)MCF-7細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，對(duì)其細(xì)胞毒性、細(xì)胞增殖率等為依據(jù)做出判斷。取得如下結(jié)果:
　　1、茶多酚、EGCG、咖啡堿、茶色素在一定范圍內(nèi)(20、50、100、200、300、400、500μg/mL)未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞毒性。茶黃素在400μg/mL

2、以下均未出現(xiàn)細(xì)胞毒性;茶氨酸濃度在高達(dá)2400μg/mL時(shí)都沒有出現(xiàn)細(xì)胞毒性。茶氨酸對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制作用不明顯;茶多酚、EGCG、咖啡堿、茶黃素、茶色素均可以明顯抑制MCF-7細(xì)胞的增殖生長，并呈現(xiàn)劑量效應(yīng)。其中同等劑量下，抑制率呈現(xiàn)以下順序:茶黃素＞EGCG＞咖啡堿＞茶多酚＞茶色素＞茶氨酸。茶氨酸在低濃度對(duì)MCF-7細(xì)胞有促進(jìn)作用，較高濃度(1600μg/mL)才表現(xiàn)出較弱的抑制作用。EGCG(500μg/mL)和茶黃素(400

3、μg/mL)的效果最為明顯，均超過60％。
　　2、選用EGCG進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)中，將EGCG用葉酸、PEG進(jìn)行修飾和制備納米粒子，并開展制備納米粒子的靶向性研究。利用激光共聚焦顯微鏡拍攝羅丹明B標(biāo)記下的納米粒子的進(jìn)入細(xì)胞的情況確定其靶向性。其中效果最好的是葉酸EGCG納米粒子;有葉酸修飾的納米粒子的靶向性高于未修飾粒子。
　　3、納米粒子在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)(20、40、80、160、240、320、400μg/mL)均未出現(xiàn)細(xì)胞毒

4、性。納米粒子在400μg/mL時(shí)，各納米粒子對(duì)MCF-7的抑制效果最為明顯，抑制效果最好的為葉酸、PEG共同修飾的納米粒子。
　　4、EGCG及其納米粒子(FA+PEG)-EGCG-NPs-1、(FA+PEG)-EGCG-NPs對(duì)PI3K-Akt信號(hào)通路的作用，能顯著下調(diào)p-PDK1、p-Akt、CyclinD1和Bcl-2蛋白的表達(dá)，但對(duì)總Akt蛋白的表達(dá)無明顯影響;并能提高PTEN、p21、Bax蛋白的表達(dá)，達(dá)到抑制乳腺癌的效