肝X受體在乳腺癌中表達(dá)及對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：肝X受體( Liver X receptors, LXRs)是由配體激活的核轉(zhuǎn)錄因子，與體內(nèi)膽固醇、脂肪酸、糖代謝和炎癥反應(yīng)等密切相關(guān)。本文觀察LXRs在乳腺癌組織中的表達(dá)，并探討其激活對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的影響及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：①收集不同乳腺組織標(biāo)本107例，其中癌旁正常乳腺組織9例、乳腺增生癥14例、導(dǎo)管原位癌29例和浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌55例，均以10％中性緩沖福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋，HE光鏡病理復(fù)查確診，且

2、證實(shí)術(shù)前未接受放、化療。采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)不同乳腺癌組織中LXRα和LXRβ的蛋白質(zhì)表達(dá)。②培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7，加入T0901317（10μM)處理細(xì)胞72h。胰酶消化收集對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞，采用MTT法和流失細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MCF-7細(xì)胞的增殖情況。③不同濃度的T0901317（0、5、10、20μM)處理MCF-7細(xì)胞24h或10μM的T0901317處理MCF-7細(xì)胞不同時(shí)間（0、6、12、24h），采用熒光定量PCR和

3、western印跡法檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白E(cyclin E)和細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表達(dá)；采用免疫共沉淀-western印跡法檢測(cè)p300與LXRα或c-fos形成的復(fù)合物。SiRNA干擾MCF-7細(xì)胞LXRα表達(dá)，觀察T0901317對(duì)細(xì)胞增殖和cyclin D1表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：①LXRα和LXRβ在乳腺正常組織基本不表達(dá)，但LXRα在不同乳腺癌病變（導(dǎo)管原位癌和浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌）中表達(dá)增高（P<0.05)，

4、在浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌尤為明顯；LXRβ在不同乳腺癌病變中不表達(dá)。②T0901317（10μM）處理明顯抑制MCF-7細(xì)胞的增殖率（P<0.05)。③隨著處理濃度和時(shí)間增加，T0901317明顯下調(diào)MCF-7細(xì)胞cyclin D1表達(dá)，對(duì)CE表達(dá)沒(méi)有明顯影響。T0901317處理明顯增加p300與LXRα形成的蛋白復(fù)合物，而減少p300與c-fos形成的復(fù)合物。干擾LXRα表達(dá)，顯著降低T0901317對(duì)MCF-7細(xì)胞cyclin D1表達(dá)的抑