環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)單純皰疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型及人乳頭瘤病毒6型和11型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:建立單純皰疹病毒（Herpes Simple Virus）Ⅰ型和Ⅱ型、人乳頭瘤病毒（Human Papillomavirus）6型和11型的LAMP檢測(cè)方法。
　　方法:分別設(shè)計(jì)擴(kuò)增各型病毒特異基因的LAMP引物，提取病毒DNA，配置LAMP反應(yīng)體系，60～65℃保溫約60 min，完成對(duì)靶病原體基因的擴(kuò)增，肉眼及電泳判定擴(kuò)增結(jié)果。LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)酶切進(jìn)一步鑒定；設(shè)立對(duì)照組，評(píng)價(jià)LAMP方法的特異性；10倍系列稀釋模板，檢

2、測(cè)LAMP技術(shù)的敏感性。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組經(jīng)LAMP后，肉眼觀(guān)察到LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn)，電泳后呈LAMP特征性梯狀條帶，對(duì)照組均無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物；HSV及HPV LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)相應(yīng)限制性?xún)?nèi)切酶酶切鑒定正確，特異性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與對(duì)照組無(wú)交叉反應(yīng)，具有特異性；LAMP可檢測(cè)到單純皰疹病毒Ⅰ型、單純皰疹病毒Ⅱ型、人乳頭瘤病毒6型、人乳頭瘤病毒11型DNA的最低濃度分別是1 pg/μL、10 pg/μL、1 pg/μL、1 pg/μL，其