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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是一種多病因所致的慢性炎癥性疾病,是心腦血管疾病發(fā)病的重要病理基礎(chǔ)之一,其發(fā)病過(guò)程涉及單核/巨噬細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞等的功能改變。CD40是相對(duì)分子質(zhì)量為40-45kd的一種Ⅰ型跨膜糖蛋白,屬于腫瘤壞死因子受體家族成員(TNF-R),CD40表達(dá)于多種細(xì)胞,與其配體CD40L結(jié)合后活化,通過(guò)激活包括NF-κB在內(nèi)的一系列下游通路,使促炎、促血栓基因的表達(dá)發(fā)生改變,在心腦血管疾病的發(fā)生
2、、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。MicroRNA(miRNA)是一段小的非編碼RNA,由長(zhǎng)約19-25個(gè)核苷酸的單鏈RNA分子構(gòu)成,可通過(guò)與靶基因mRNA3'-UTR區(qū)互補(bǔ)配對(duì),調(diào)控靶基因mRNA和蛋白的表達(dá),我們通過(guò)前期的生物信息學(xué)方法發(fā)現(xiàn)CD40可能是miR-145重要的靶基因。姜黃素(Curcumin)是從植物姜黃中提取的一種黃色酸性酚類(lèi)物質(zhì),具有抗炎、內(nèi)皮保護(hù)、抗腫瘤等多種藥理作用。
目的:探討miR-145在動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗
3、塞中的表達(dá)情況,并從細(xì)胞水平探討姜黃素及辛伐他汀對(duì)高濃度Hcy處理的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)中miR-145,CD40表達(dá)的影響。
方法:收集對(duì)照組及AS性腦梗塞患者血漿及PBMCs,real-time PCR法檢測(cè)其中miR-145的表達(dá)水平;miR-145 mimics轉(zhuǎn)染PBMCs,觀察miR-145及CD40表達(dá)變化;培養(yǎng)PBMCs,分組處理如下
4、:正常對(duì)照組、Hcy組(1×10-3 mol·L-1)、不同濃度的Cur組、辛伐他汀組,孵育24h后,Real-time PCR檢測(cè)各組PBMCs中miR-145、CD40 mRNA表達(dá)水平,Westem Blot檢測(cè)CD40蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:⑴AS性腦梗塞患者血漿及PBMCs中miR-145表達(dá)水平較對(duì)照組顯著升高;⑵miR-145 mimics轉(zhuǎn)染的PBMCs中miR-145表達(dá)顯著升高,CD40mRNA的表達(dá)顯著降低
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