CD73在動脈粥樣硬化進程中的作用及其機制研究.pdf

1、論文題目CD73在動脈粥樣硬化進程中的作用及其機制研究StudyontheroleofCD73inartheroselerosis碩士研究生:簡蓉蓉專業(yè):病理學與病理生理學導師:周平副教授導師組成員:殷蓮華教授李曉波講師支秀玲講師2010年5月14日CD73在動脈粥樣硬化進程中的作用及其機制研究中文摘要Cn73即胞外一5’一核普酸酶(eeto一5’一nueleotidase，eN)，是由GPI錨定在細胞膜外表面的糖蛋白。其主要功能是水解

2、AMP生成重要的生理活性物質腺普。胞外腺普通過作用于靶細胞膜上4種G蛋白偶聯(lián)的腺普受體(AIR、AZaR、AZbR、A3R)，發(fā)揮抑制炎癥、擴張血管、提高內皮屏障功能、刺激血管新生、抑制血小板聚集、減少自由基產生等作用[l]。近年還有研究發(fā)現(xiàn)I2]，cD73參與了脂肪細胞中的脂滴形成過程，而血脂水平增高是動脈粥樣硬化(叭herosclerosis，AS)的重要危險因素，這提示CD73在動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展過程中可能發(fā)揮著重要作用，但

3、是如何發(fā)揮作用及其作用機制目前國內外尚無報導。本課題首先利用CD73一八敲基因小鼠和APoE一八敲基因小鼠進行雜交，培育出CD73一八APOE一八雙基因敲除小鼠，然后高脂喂養(yǎng)建立動脈粥樣硬化模型，整體水平研究CD73對動脈粥樣硬化斑塊形成的影響，并探討CD73在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用機制，從而為動脈粥樣硬化的防治提供新的靶點及途徑。本研究主要分為三部分:第一部分培育出CD73一八ApoE一八雙基因敲除小鼠。利用CD73一人小鼠與相

4、同遺傳背景APOE一人小鼠雜交，產生的Fl代小鼠與ApoE一人小鼠回交，在其FZ代中篩選出基因型為CD73一ApoE一人的小鼠，再進行互交，從F3代中篩選出CD73一人ApoE一人后代。運用PCR方法對小鼠的基因型進行鑒定。根據PCR產物凝膠電泳的結果，能同時擴增出280bp和245bp片段的小鼠為成功培育的CD73一一ApoE一一小鼠。第二部分選擇CD73一八、CD73、CD73一八ApoE一八及Ap0E一八四組4周齡小鼠予以高脂飼料

5、喂養(yǎng)8周，同樣分組的小鼠予以高脂飼料喂養(yǎng)16周，構建動脈粥樣硬化模型，檢測各組小鼠的體重、血脂水平，觀察主動脈血管斑塊形成情況。實驗結果顯示，CD73一八與CD73小鼠體重、血脂水平無統(tǒng)計學差異，而CD73一八Ap0E一八小鼠體重明顯低于ApoE一八小鼠，目CD73一八Ap0E一八小鼠的血漿甘油三酷、總膽固醇、低密度脂蛋白也明顯低于APoE一八小鼠，但高密度脂蛋白和脂蛋白(a)無明顯統(tǒng)計學差異。選取左鎖骨卜動脈下Zmm開始至骼動脈分支處