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文檔簡介
1、目的:探討線粒體Cx43在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用與信號通路機(jī)制。
方法:實(shí)驗(yàn)建立兩個(gè)模型,①PDGF-BB刺激VSMCs增殖模型,分為3個(gè)小組:a.對照組,b.PDGF-BB組,c.PD98059+PDGF-BB組;②建立血管平滑肌細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)模型(VSMCs-ECs Co-culture model),分為兩個(gè)小組:a.對照組,b.TNF-α組。采用MTT比色法檢測各組VSMCs活性;熒光探針檢測活性氧 Reactiv
2、e oxygen species(ROS);Western blot檢測各組血管平滑肌細(xì)胞線粒體Cx43蛋白表達(dá)。
結(jié)果:⑴VSMCs增殖模型結(jié)果顯示:MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:PDGF-BB組較control組吸光度值顯著增加(P<0.05),PD98059+PDGF-BB組較 control組吸光度值顯著減?。≒<0.05);PD98059+PDGF-BB組較PDGF-BB組吸光度值顯著降低(P<0.01);熒光探針檢測活性氧,
3、熒光強(qiáng)弱與活性氧多少成正比。PDGF-BB組較control組,綠色熒光增強(qiáng),提示活性氧增加。PD98059+PDGF-BB組綠色熒光較control組和PDGF-BB組減弱,提示活性氧減少;Western blot結(jié)果:PDGF-BB組control組線粒體Cx43蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01),PD98059+PDGF-BB組比control組線粒體Cx43蛋白表達(dá)顯著減少(P<0.05),PD98059+PDGF-BB組比PDG
4、F-BB組線粒體Cx43蛋白表達(dá)顯著減少(P<0.01)。⑵VSMCs-ECs共培養(yǎng)模型結(jié)果顯示:MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:TNF-α組較control組吸光度值顯著增加(P<0.05);熒光探針檢測活性氧:TNF-α組與control組相比,綠色熒光強(qiáng)度增強(qiáng),提示活性氧增加;Western blot結(jié)果:TNF-α組與control組相比,線粒體Cx43蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01)。
結(jié)論:①PDGF-BB誘導(dǎo)VSMCs增殖及
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