新型核苷類似物FNC對(duì)Raji細(xì)胞的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、背景和目的:
　　 惡性淋巴瘤是一種實(shí)體瘤，起源于淋巴造血組織。淋巴瘤臨床表現(xiàn)變化多端，尤其是非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin lymphoma，NHL)，容易侵犯結(jié)外組織，幾乎包括人體各種組織和器官，給臨床診斷和治療帶來很大困難。化學(xué)治療在侵襲性NHL的綜合治療中占主導(dǎo)地位，但傳統(tǒng)化療方案的治愈率較低，因此探索NHL的發(fā)生機(jī)制，尋找新的治療方法和化療藥物是最終治愈此類疾病的根本出路。
　　 核苷類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與

2、體內(nèi)正常代謝物相似，因此能摻入到細(xì)胞的DNA與RNA中，抑制核酸的生成，干擾細(xì)胞的正常代謝。目前，核苷類似物是一類重要的抗腫瘤藥物，在抗癌市場(chǎng)中占據(jù)了近五分之一份額。2'-氟-4'疊氮-核苷類似物（FNC）由鄭州大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院合成，前期的研究工作提示FNC可能對(duì)NHL有較好的治療作用。Raji細(xì)胞是人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞，屬高侵襲性NHL，故本實(shí)驗(yàn)選用Raji細(xì)胞進(jìn)行深入研究。
　　 方法:
　　 分別用0、

3、0.035、0.35、3.5、35和350μmol·L-1的FNC處理Raji細(xì)胞24、48、72 h后，應(yīng)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率;分別用0、0.035、0.175、0.875、4.375μmol·L-1FNC處理Raji細(xì)胞48 h后用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡率，用RT-PCR技術(shù)與Western blot法分別檢測(cè)細(xì)胞中Bcl-6、PRDM1、C-myc基因及蛋白的表達(dá)水平;分別用0、4.375μmol·L-1

4、FNC處理Raji細(xì)胞48 h后用透射電鏡觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)。
　　 結(jié)果:
　　 (1) FNC可顯著抑制Raji細(xì)胞的增殖，呈明顯的時(shí)間劑量依賴性（F濃度=4869.984, F時(shí)間=1785.062,F交互=126.281， P＜0.001）;
　　 (2) FNC可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，阻滯細(xì)胞周期于G0/G1期(P＜0.05)
　　 (3)隨著FNC濃度的增加，Raji細(xì)胞中Bcl-6、C-myc基因及

5、蛋白的表達(dá)降低(F=65.497、68.502、59.086、78.285，P＜0.001)，PRDM1基因及蛋白的表達(dá)升高(F=81.133、85.234，P＜0.001)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)一定濃度的FNC可抑制Raji細(xì)胞的增殖。
　　 (2)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，下調(diào)Bcl-6、C-myc基因和蛋白的表達(dá)、上調(diào)PRDM1基因及蛋白的表達(dá)，可能是FNC抗腫瘤作用的重要機(jī)制。
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