2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、分類號:R 7 3 7 .2 5密 級:學(xué)位類別: 科學(xué)學(xué)位團(tuán) 專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼:學(xué) 號:學(xué)科門類:l0O622 0 1 0 6 0 1 1 0 6醫(yī)學(xué)夭蚌魯科袁垮 警I 矗N J I N 黼£D I e A | - U 瓣l V E R S l W博士學(xué)位論文D o C T o R A L D I S S E R T A T I o N論文題目:腫瘤細(xì)胞中鐵輸出蛋白f e r r o p o r t i n 異常調(diào)控的機制研究T I

2、T L E :T h e m o l e c u l a r m e c h a n i s mu n d e r l y i n g d e r e g u l a t i o no fi r o ne x p o r t e r f e r r o p o r t i ni nt u m o r s一級學(xué)科:臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科:外科學(xué)泌尿外論文作者:陳岳指導(dǎo)教師:徐勇教授導(dǎo)師組成員:劉思金研究員張志宏教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年

3、五月天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要目的探討f e r r o p o r t i n 異常表達(dá)在前列腺癌和乳腺癌細(xì)胞增殖中的作用,并進(jìn)一步明確其調(diào)節(jié)的分子機制。方法通過q R T - P C R 和W e s t e mb l o t 檢測f e r r o p o r t i n 在乳腺癌組織中的m R N A 和蛋白表達(dá)水平,構(gòu)建f e r r o p o r t i n 高表達(dá)質(zhì)粒,應(yīng)用f e r r o p o r t i n

4、 高表達(dá)質(zhì)粒和f e r r o p o r t i n 特異性s h R N A 轉(zhuǎn)染前列腺癌P C 3 細(xì)胞和乳腺癌M D A .M B .2 3 1 細(xì)胞,建立f e r r o p o r t i n 穩(wěn)定高、低表達(dá)的腫瘤細(xì)胞系,運用細(xì)胞計數(shù)、M T T 和B r d U 等方法檢測f e r r o p o r t i n 異常表達(dá)對腫瘤細(xì)胞增殖的影響,克隆形成實驗檢測其對腫瘤形成能力的作用,并通過構(gòu)建腫瘤動物模型對體外實驗結(jié)

5、果進(jìn)行驗證;為了探討f e r r o p o r t i n 異常表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機制,我們通過文獻(xiàn)檢索、網(wǎng)絡(luò)軟件和基因芯片等手段,對f e r r o p o r t i n 啟動子3 .0k b 區(qū)域進(jìn)行預(yù)測并選定N r f 2 和M Z F 一1 作為研究對象,應(yīng)用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)檢測N r f 2 、M Z F 一1 與f e r r o p o r t i n 啟動子的相互作用,然后構(gòu)建含有或不含N r f 2 、M Z

6、F .1 結(jié)合位點的l u c i f e r a s e 報告基因質(zhì)粒,通過l u c i f e r a s e 報告基因?qū)嶒灧治霾煌Y(jié)合位點在轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)f e r r o p o r t i n表達(dá)中的作用,并運用組織篩查和特異性s i R N A 沉默技術(shù),對結(jié)果進(jìn)一步驗證;我們應(yīng)用M Z F .1 高表達(dá)質(zhì)粒和M Z F .1 特異性s i R N A 轉(zhuǎn)染P C 3 細(xì)胞,通過細(xì)胞計數(shù)、M T T 、B r d U 和細(xì)胞活力

7、檢測等方法檢測M Z F .1 異常表達(dá)對腫瘤細(xì)胞增殖的影響,然后利用網(wǎng)絡(luò)工具分別對M Z F .13 ’U T R 區(qū)域和啟動子3 .0 k b 區(qū)域進(jìn)行預(yù)測,尋找可能的m i R N A s 和轉(zhuǎn)錄因子; m i R - 4 9 2m i m i c 轉(zhuǎn)染P C 3 細(xì)胞后,細(xì)胞計數(shù)、M T T 和B r d U 檢測細(xì)胞增殖能力,W e s t e m b l o t 檢測M Z F .1 蛋白表達(dá)水平,構(gòu)建M Z F —l 3

8、’U T R 的l u c i f e r a s e 報告基因質(zhì)粒,通過l u c i f e r a s e 報告基因?qū)嶒灧治鰉 i R - 4 9 2 對M Z F 一1 的調(diào)節(jié);我們利用A P 4 、c .M y b 特異性s i R N A 技術(shù),通過q R T - P C R 和W e s t e r n b l o t 檢測M Z F .1 的m R N A 和蛋白表達(dá)水平,然后應(yīng)用染色質(zhì)免疫共沉淀實驗明確A P 4 、c

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