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文檔簡介
1、目的:研究胰腺星狀細(xì)胞(pancreatic stellate cell,PSC)對胰島β細(xì)胞胰島素分泌功能及其增殖和凋亡的影響。 方法: 1、免疫組化法檢測2型糖尿病患者胰腺組織連續(xù)切片中α-平滑肌肌動蛋白(α-Smooth mllscle actin,α-SMA)及胰島素的表達。 2、分離培養(yǎng)大鼠PSC,獲取胰腺星狀細(xì)胞上清(pancreatic stellate cell-supernatants,PSC-
2、SN)。 3、PSC-SN干預(yù)胰島β細(xì)胞株Ins-1及RINm5f。 4、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(electrochemiluminescentimmunoassay,ECLIA)檢測Ins-1培養(yǎng)液中胰島素的分泌量。 5、溴脫氧尿苷(broHlodeoxyuridine,BrdU)核素滲入法觀察RINm5f的增殖,蛋白免疫印跡法(Western blotting)檢測其procasepase 3的表達情況。
3、 結(jié)果: 1、免疫組化染色觀察到胰島內(nèi)存在α-SMA染色陽性的區(qū)域,該區(qū)域內(nèi)胰島素染色為陰性。 2、與對照組相比,PSC-SN干預(yù)組Ins-1培養(yǎng)液中胰島素的含量明顯減少(P<0.05),且胰島素含量隨PSC*SN濃度的增加而減少(P<0.05)。在不同的葡萄糖濃度下,PSC-SN的干預(yù)均可使Ins.1培養(yǎng)液中胰島素的含量減少(P<0.05)。 3、與對照組相比,PSC-*SN干預(yù)組RIN.m5fBrdU染色陽
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