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文檔簡介
1、目的:胰腺癌是一種惡性程度很高的消化道腫瘤。近年研究發(fā)現(xiàn)胰腺星狀細(xì)胞(pancreatic stellate cells PSCs)與胰腺癌纖維結(jié)締組織增生關(guān)系密切。胰星狀細(xì)胞與胰腺癌細(xì)胞間是否存在相互作用,胰星狀細(xì)胞在胰腺癌發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中起著怎么的作用,其分子機(jī)制是什么,有關(guān)這方面的研究,目前尚無明確的結(jié)論,仍處于探索階段。本研究目的利用建立的細(xì)胞-細(xì)胞共培養(yǎng)模型,研究胰星狀細(xì)胞與胰腺癌細(xì)胞株BXPC3共培養(yǎng)時(shí)對胰腺癌細(xì)胞增殖、凋亡
2、的影響。
方法:1、制備胰腺星狀細(xì)胞
2、PSCs和BXPC3直接共培養(yǎng):以含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基種2×106個(gè)胰腺癌細(xì)胞BXPC3于24孔板中培養(yǎng),每個(gè)培養(yǎng)孔中置入0.4um孔徑的transwell小室,小室內(nèi)加入2×105個(gè)鼠PSCs,同樣以含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)。
3、檢測PSC與BXPC3直接共培養(yǎng)對BXPC3增殖(MTT實(shí)驗(yàn),分別培養(yǎng)24、48、72h)、凋亡(流式Annexi
3、nⅤ/PI雙標(biāo)法,分別培養(yǎng)48h)和克隆形成(分別培養(yǎng)14、21、28d)的影響。
結(jié)果:與單獨(dú)培養(yǎng)的癌細(xì)胞株BXPC3相比,鼠PSCs細(xì)胞對胰腺癌細(xì)胞株BXPC3細(xì)胞共培養(yǎng)結(jié)果為對照組和實(shí)驗(yàn)組24h、48h、72h的增值率分別為0.6637±0.0137vs0.8100±0.0308(p<0.05);0.8043±0.0125vs1.3870±0.2293(p<0.05);1.1399±0.0956vs1.9119±0.08
4、87(p<0.05)。對照組和實(shí)驗(yàn)組的克隆率在三個(gè)時(shí)間段14d、21d、28d分別是0.0851±0.0033 vs0.1560±0.0070(p<0.05);0.4191±0.0242 vs0.6014±0.0247(p<0.05);0.7657±0.0036 vs0.9485±0.0363(p<0.05)。對照組和實(shí)驗(yàn)組48h的凋亡率對比為:10.66% vs4.55%。
結(jié)論:胰星狀細(xì)胞可能通過促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的增殖和克隆
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