索拉菲尼、PDTC聯(lián)用對(duì)胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1的作用研究.pdf

1、目的:探討多分子靶向藥物索拉菲尼(sorafenib)聯(lián)用PDTC對(duì)體外人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1的細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期的影響;以及其對(duì)細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中NF-kB表達(dá)的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。試驗(yàn)組分索拉菲尼單藥物、PDTC單藥組及聯(lián)合藥物組,其中設(shè)空白對(duì)照組,空白對(duì)照組為未加藥的培養(yǎng)液。以MTT法檢測(cè)各藥物組對(duì)胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1細(xì)胞增殖的抑制作用;流式細(xì)胞

2、儀檢測(cè)各組藥物對(duì)細(xì)胞周期的影響;免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察各藥物組NF-κB在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1.MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示:索拉菲尼和PDTC均能抑制胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1的增殖,且均隨藥物濃度的增加作用也增強(qiáng),呈劑量—時(shí)間雙效應(yīng)關(guān)系(P<0.05);并分別計(jì)算出作用48h單藥組細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)值索拉菲尼為14.102μmol/L、PDTC為105.717μmol/L,濃度值均較高,說

3、明索拉菲尼和PDTC單藥組對(duì)PANC-1缺乏有效抑制;而低濃度索拉菲尼(3μmol/L)和低濃度PDTC(25μmol/L)聯(lián)合應(yīng)用較單用索拉菲尼(3μmol/L)和PDTC(25μmol/L),能顯著提高細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(P<0.05)。
　　2.流式細(xì)胞儀法檢測(cè)結(jié)果顯示:與空白對(duì)照組相比,索拉菲尼(3μmol/L)、PDTC(25μmol/L)、索拉菲尼(3μmol/L)+PDTC(25μmol/L)處理48h后PANC-1細(xì)胞

4、的G0/G1期百分比升高,分別為(50.93±3.51,48.07±1.70,74.07±2.40)％,而空白對(duì)照組G0/G1期細(xì)胞比例(37.97±1.21)%;S期細(xì)胞數(shù)相應(yīng)的減少,分別為(37.30±1.70,38.17±0.51)%,而空白對(duì)照組S期細(xì)胞比例為(45.33±2.03)%,差別同樣有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);說明索拉菲尼、PDTC及索拉菲尼+PDTC聯(lián)合藥物組細(xì)胞發(fā)生G0/G1期停滯(P<0.05),且索拉菲尼+

5、PDTC聯(lián)合藥物組統(tǒng)計(jì)學(xué)最為顯著意義。
　　3.免疫組化法檢測(cè)結(jié)果顯示:NF-κB在對(duì)照組中胰腺癌PANC-1細(xì)胞胞漿和胞核中均有表達(dá),索拉菲尼誘導(dǎo)48h后NF-κB在胰腺癌PANC-1細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)明顯增強(qiáng)。然而,當(dāng)用PDTC聯(lián)合索拉菲尼誘導(dǎo)48h后,胰腺癌PANC-1細(xì)胞核中NF-κB的表達(dá)明顯減弱。
　　結(jié)論:索拉菲尼和PDTC在體外對(duì)PANC-1細(xì)胞增殖均具有抑制作用,但I(xiàn)C50值均較高。PDTC和索拉菲尼聯(lián)合應(yīng)用較單