卡培他濱對(duì)食管細(xì)胞系SHEE及SHEEC作用研究.pdf

1、目的：探討卡培他濱對(duì)食管上皮永生化細(xì)胞系SHEE和其癌化細(xì)胞系SHEEC的作用以及與胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase，TP)表達(dá)的關(guān)系，為卡培他濱在食管癌化療中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)資料和依據(jù)。
　　 方法：采用免疫組織(細(xì)胞)化學(xué)染色法檢測(cè)SHEE、SHEEC中TP的表達(dá)，并與食管鱗癌、癌旁正常上皮組織的TP表達(dá)進(jìn)行對(duì)比。收集人口服卡培他濱前、后的血清，為體外細(xì)胞藥敏實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備，并應(yīng)用高效液相色譜分析法檢測(cè)

2、血清中有效代謝物(5-Fu、5'-DFUR)的濃度。應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)人口服卡培他濱后血清和5-Fu、5’-DFUR對(duì)SHEE、SHEEC細(xì)胞增殖的影響。
　　 結(jié)果：TP的檢測(cè)：SHEE細(xì)胞TP表達(dá)呈陰性，SHEEC細(xì)胞TP表達(dá)呈陽(yáng)性，陽(yáng)性反應(yīng)定位于胞漿，部分細(xì)胞核也有陽(yáng)性著色；正常食管上皮組織TP蛋白表達(dá)為陰性，食管鱗癌組織中TP性表達(dá)陽(yáng)，表達(dá)率為76.09[％](35/46)，陽(yáng)性反應(yīng)主要定位于細(xì)胞胞漿，細(xì)

3、胞間質(zhì)也可見(jiàn)TP蛋白表達(dá)。人口服卡培他濱后血清(含藥血清)中有效代謝物5-Fu、5'-DFUR的濃度分別為103.75ng/ml、2278ng/ml；人口服卡培他濱前血清未檢測(cè)到有效的代謝物5-Fu、5'-DFUR。含藥血清和5-Fu、5’-DFUR對(duì)SHEE、SHEEC細(xì)胞增殖的影響：在一定濃度和時(shí)間范圍內(nèi)，含藥血清、5-Fu、5’-DFUR對(duì)SHEEC，含藥血清、5-Fu對(duì)SHEE，均以時(shí)間-劑量依賴(lài)的方式抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，作用48h時(shí)

4、抑制率達(dá)到最大值；5’-DFUR對(duì)SHEE細(xì)胞無(wú)明顯生長(zhǎng)抑制作用；濃度10[％]的含藥血清后對(duì)SHEE和SHEEC細(xì)胞作用48h抑制率分別為11.23[％]、23.63[％]，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；10.375ng/ml的5-Fu(與濃度10[％]的含藥血清中5-Fu的濃度相等)對(duì)SHEE和SHEEC作用48h后細(xì)胞的抑制率分別為10.57[％]、9.98[％]，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；227.8ng/ml的5’-DFUR

5、(與濃度10[％]含藥血清中5’-DFUR的濃度相等)對(duì)SHEE和SHEEC細(xì)胞作用48h后的抑制率分別為1.69[％](P>0.05)、16.76[％]，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；10.375ng/ml 5-Fu+227.8ng/ml 5’-DFUR(分別與濃度10[％]含藥血清中5-Fu、5’-DFUR的濃度相等)對(duì)SHEE和SHEEC細(xì)胞作用48h后抑制率分別為9.78[％]、22.51[％]，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，和