天麻質(zhì)量控制及體內(nèi)代謝動力學(xué)研究.pdf

1、天麻（Gastrodia elata Bl.）是蘭科植物天麻的干燥塊莖，是我國常用的傳統(tǒng)名貴中藥，《神農(nóng)本草經(jīng)》將其列為上品，《中國藥典》各版將其列為收藏品種，2002年被國家衛(wèi)生部列為保健食品名單。主要成分含有酚類及其苷類，有“治風(fēng)之神藥”之稱。對中樞神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)有很好的保護(hù)作用，具有增加機(jī)體免疫功能、抗炎和促智抗衰老的功效，最新研究表明天麻還有平喘的功效。
　　然而，天麻藥效物質(zhì)的作用機(jī)制研究比較薄弱，制約了天麻醫(yī)藥產(chǎn)

2、業(yè)的深度開發(fā)。為對天麻作用物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制復(fù)雜性的闡明提供科學(xué)依據(jù)，本論文在課題組前期進(jìn)行天麻藥代動力學(xué)研究的基礎(chǔ)上，開展了天麻的血清藥物化學(xué)研究，以體內(nèi)多種移行成分來控制天麻藥材的內(nèi)在質(zhì)量，同時，以天麻藥材為研究對象，分析各組分在動物體內(nèi)的動態(tài)變化和時-量關(guān)系。以期為評價天麻有效成分在體內(nèi)代謝過程中的內(nèi)在質(zhì)量，探討天麻藥理毒理作用，促進(jìn)新藥研發(fā)和劑型改進(jìn)提供科學(xué)依據(jù)。具體研究如下：
　　一、基于入血成分的天麻中天麻素和巴利森苷

3、的含量測定研究
　　建立并驗證了UPLC-ESI-MS/MS法測定大鼠血漿中天麻素(GAS)和巴利森苷(PA)的含量方法，結(jié)果表明，大鼠口服天麻提取物后，GAS和PA均以原型入血。結(jié)合HPLC檢測技術(shù)，建立并驗證了RP-HPLC法測定天麻中 GAS和PA的含量方法，方法學(xué)考察結(jié)果表明，該方法精密度高，穩(wěn)定性好，線性關(guān)系良好，平均回收率均在95％以上。用所建立的RP-HPLC含量測定方法測定10批天麻藥材中入血成分的含量，結(jié)果表明不

4、同產(chǎn)地天麻中GAS含量較穩(wěn)定，PA含量差別很大。在中藥血清藥物化學(xué)的指導(dǎo)下，分析口服給藥后入血成分，以血中移行成分來控制藥材的內(nèi)在質(zhì)量，能更加客觀全面的評價藥材真實質(zhì)量，為中藥質(zhì)量控制提供了新思路。
　　二、口服天麻微粉和提取物后天麻素和巴利森苷的組織分布研究
　　建立并驗證了UPLC-ESI-MS/MS法測定大鼠各組織中 GAS和PA的含量方法。該方法靈敏度高、準(zhǔn)確度高、無基質(zhì)干擾。利用該方法對單次灌胃天麻微粉和提取物后，

5、GAS和PA在大鼠各組織(包括腦、心、肝、脾、肺和腎六個組織)中的分布情況進(jìn)行研究。結(jié)果表明：灌胃4 g·kg-1天麻微粉后，GAS和PA均能快速分布到心、肝、脾、肺、腎中，其中腎和肺中含量最高；腦組織中，PA有一定分布，但未檢測到GAS。灌胃600 mg·kg-1天麻提取物(相當(dāng)于4 g·kg-1生藥材)后，GAS和PA均能快速分布到心、肝、脾、肺、腎中，其中腎中含量最高；在腦組織中，PA有一定分布，但未檢測到GAS。
　　組織

6、分布數(shù)據(jù)表明：不同給藥形式的組織分布特征基本一致，PA在體內(nèi)代謝速率比GAS快；與提取物給藥相比，微粉給藥后兩組分在各組織中含量高且代謝時間長。
　　三、天麻提取物中天麻素和巴利森苷的腦組織藥動學(xué)研究
　　單次灌胃10.50 g·kg-1天麻提取物后，在腦組織中能檢測到GAS，濃度為878.66 ng·g-1，整個腦組織中含量為1052.87 ng；PA濃度為1289.78 ng·g-1，整個腦組織中含量為1540.90 n

7、g。結(jié)果表明：增大給藥劑量后，GAS和PA均能在腦組織中檢測到；此外，兩組分在腎和肺中可能存在蓄積現(xiàn)象。
　　四、天麻中天麻素的提取工藝研究
　　此外，本論文還采用單因素試驗結(jié)合響應(yīng)面法對天麻中GAS的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。最佳提取工藝參數(shù)為：熱回流提取，以水為提取溶劑，料液比1:12.56(g:mL)，提取時間3.54 h，pH5.23，在此條件下GAS的提取量為8.29 mg·g-1，與理論預(yù)測值的誤差僅為1.2%。該工藝