花椒麻素在大鼠體內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、花椒麻素是花椒中一類重要的活性物質(zhì)，具有抗炎鎮(zhèn)痛、麻醉、殺蟲、除皺、調(diào)節(jié)胃腸道系統(tǒng)等功能，可應(yīng)用于醫(yī)藥和化妝品行業(yè)。目前花椒的消費(fèi)方式主要為食用，價(jià)格低廉，制成藥物制劑，可有效提高經(jīng)濟(jì)價(jià)值，而藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究是新藥研制過程中必不可少的環(huán)節(jié)。目前尚未發(fā)現(xiàn)花椒麻素在生物體內(nèi)相關(guān)的研究報(bào)道，因此，研究花椒麻素的藥物代謝動(dòng)力學(xué)對(duì)于開發(fā)其相關(guān)生物制劑具有重要意義。本論文以花椒麻素為原料，采用高效液相色譜(HPLC-UV)分析檢測(cè)技術(shù)，系統(tǒng)的探討

2、了花椒麻素在大鼠體內(nèi)的吸收、分布、代謝及排泄情況。
　　(1)根據(jù)腸循環(huán)液、組織樣品、糞便、尿液、膽汁等不同生物樣品的特性，選取有效的前處理方法，建立高效液相色譜(HPLC)法測(cè)定生物樣品樣品中花椒麻素含量的方法。采用島津Intersil ODS-SP C18(250mm×4.6mm5μm)為分析柱，五味子醇甲為內(nèi)標(biāo)，流動(dòng)相為甲醇-水(70∶30)，流速為0.5mL·min-1，柱溫35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣量20μL。該

3、法準(zhǔn)確快速、回收率高、穩(wěn)定性好，適用于生物樣品中花椒麻素含量的測(cè)定。
　　(2)采用大鼠在體腸灌流模型，研究三種不同濃度的花椒麻素對(duì)大鼠十二指腸、空腸、回腸和結(jié)腸吸收的影響，初步探討花椒麻素腸吸收動(dòng)力學(xué)特征。結(jié)果顯示:25、50和100μg·mL-1的花椒麻素溶液在大鼠各腸段內(nèi)的吸收速率常數(shù)在0.0030-0.0065min-1之間，吸收百分率在30.16％～56.81％之間，其吸收過程屬于一級(jí)動(dòng)力學(xué)過程，吸收機(jī)制為被動(dòng)擴(kuò)散。花椒

4、麻素的吸收速率常數(shù)按空腸、回腸、十二指腸、結(jié)腸的順序依次下降，空腸和回腸是花椒麻素吸收的主要部位。
　　(3)按40mg·Kg-1灌胃給予花椒麻素，在不同時(shí)間點(diǎn)取心、肝、脾、肺、腎等14個(gè)組織，研究花椒麻素的分布情況，確定花椒麻素的主要作用部位。結(jié)果顯示:給藥15min后，花椒麻素可廣泛分布于各個(gè)組織器官，主要分布在胃、脂肪、皮膚、肌肉、前列腺及肝臟中，多數(shù)組織給藥30min后，藥物濃度達(dá)到峰值，隨后逐漸下降。此外，花椒麻素可透過

5、血腦屏障和血睪屏障，易在脂肪、皮膚和前列腺中蓄積，其他組織無明顯蓄積現(xiàn)象。
　　(4)灌胃給予花椒麻素，研究花椒麻素對(duì)大鼠肝臟CYP450及蛋白總量的影響，并以肝微粒體為載體，確定花椒麻素的酶促動(dòng)力學(xué)。結(jié)果顯示:花椒麻素對(duì)大鼠肝臟、腎臟及小腸中的微粒體無顯著誘導(dǎo)作用，不影響肝微粒體蛋白含量、CYP450及CYPb5含量?；ń仿樗卦诖笫蟾挝⒘ｓw中最佳溫孵條件為:肝微粒體蛋白濃度為0.5mg·mL-1，花椒麻素濃度為40μg·mL-1

6、，37℃孵育30min。酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)回歸方程為y=2.6576x+0.1568(r=0.971)，最大反應(yīng)速度Vmax為6.38μg·mL-1·min-1·g-1 protein，米氏常數(shù)Km為16.95μg·mL-1，內(nèi)在清除率CLint為0.38mL·min-1·g-1protein。
　　(5)灌胃給予花椒麻素，分別收集膽汁、糞便和尿液，根據(jù)膽汁、尿液及糞便中的原形藥物的含量，判斷花椒麻素的排泄。結(jié)果顯示:0-72h內(nèi)，尿