應(yīng)力刺激下成牙骨質(zhì)細(xì)胞OPG-RANKL的表達(dá)及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究.pdf

1、正畸力作用下牙周組織的改建是正畸治療的生物學(xué)基礎(chǔ),牙周組織改建包括牙槽骨、牙周膜和牙骨質(zhì)的改建，通過組織改建一方面使牙齒排列整齊、咬合關(guān)系改善以解決病人美觀及功能問題，另一方面則產(chǎn)生了牙根吸收的副作用。 成牙骨質(zhì)細(xì)胞是牙骨質(zhì)的功能細(xì)胞，在牙根形成、牙周病牙骨質(zhì)的再生以及正畸相關(guān)炎性牙根吸收(OIIRR)的修復(fù)中起著重要的作用。關(guān)于正畸力作用下成牙骨質(zhì)細(xì)胞的功能受到了怎樣的影響，以及其與OIIRR的發(fā)生發(fā)展有什么樣的聯(lián)系，在國內(nèi)外

2、少見報道。 本課題利用四點彎曲力學(xué)加載系統(tǒng)，采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)、實時熒光定量PCR、Western免疫印跡等方法，研究體外培養(yǎng)的成牙骨質(zhì)細(xì)胞株OCCM-30在不同力學(xué)環(huán)境中增殖活性的變化，以及其表達(dá)骨保護素(OPG)和破骨細(xì)胞分化因子(RANKL)的mRNA的變化，探討應(yīng)力刺激對成牙骨質(zhì)細(xì)胞表達(dá)破骨細(xì)胞分化調(diào)控蛋白的影響，并通過對應(yīng)力刺激下成牙骨質(zhì)細(xì)胞分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)家族中的ERK1/2、P38MAPK活性

3、的變化及其與OPG、RANKL基因表達(dá)變化關(guān)系的研究，對力學(xué)刺激調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化調(diào)控蛋白的相關(guān)上游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路進行初步探討。從細(xì)胞力學(xué)和分子生物學(xué)水平對正畸力作用下成牙骨質(zhì)細(xì)胞的功能變化與牙根吸收的關(guān)系進行了初步揭示，為進一步闡明正畸相關(guān)炎性根據(jù)實驗結(jié)果得出以下結(jié)論： 1．2000 μ strain牽張或壓縮應(yīng)力加載3h、6h后細(xì)胞增殖活性降低；隨著加力時間的延長，細(xì)胞增殖活性恢復(fù)，加載24h后與對照組無明顯差異。張、壓應(yīng)力對增

4、殖活性的影響趨勢一致，相互之間無明顯差別。 2．2000 μ strain牽張或壓縮應(yīng)力均可抑制成牙骨質(zhì)樣細(xì)胞OPG和RANKLmRNA的表達(dá)。牽張應(yīng)力對OPG的抑制作用較壓縮應(yīng)力更強，而壓縮應(yīng)力對RANKL的抑制作用較牽張應(yīng)力更強。 3．牽張應(yīng)力升高成牙骨質(zhì)樣細(xì)胞RANKL/OPG比值，表明牽張應(yīng)力作用后的成牙骨質(zhì)樣細(xì)胞可促進破骨細(xì)胞的分化和活化。 4．壓縮應(yīng)力在3h、6h降低成牙骨質(zhì)樣細(xì)胞RANKL/OPG比

5、值，表明壓縮應(yīng)力作用后的成牙骨質(zhì)樣細(xì)胞對破骨細(xì)胞的分化和活化有短暫的抑制作用，但從長時間來看，其對破骨細(xì)胞的分化和活化影響不明顯。 5．2000 μ strain牽張或壓縮應(yīng)力均可以激活OCCM30內(nèi)的ERK1/2信號通路，牽張應(yīng)力所產(chǎn)生的激活效應(yīng)較壓縮應(yīng)力更強，表明ERK1/2參與了成牙骨質(zhì)細(xì)胞對力學(xué)信號的早期應(yīng)答，提示ERK1/2可能參與了應(yīng)力刺激對OPG、RANKL．表達(dá)的調(diào)控。 6．2000 μ strain牽張

6、或壓縮應(yīng)力均不能激活OCCM30內(nèi)的P38MAPK信號通路，提示該通路不參與成牙骨質(zhì)細(xì)胞對力學(xué)信號的早期應(yīng)答。 提示：應(yīng)力刺激可以改變成牙骨質(zhì)細(xì)胞OPG、RANKL的表達(dá)，進而影響破骨細(xì)胞的分化和活化，參與牙根吸收的調(diào)節(jié)，正畸力作用下成牙骨質(zhì)細(xì)胞的功能變化可能是決定牙根吸收與修復(fù)進程的細(xì)胞基礎(chǔ)，正畸臨床上合理使用矯治力是避免嚴(yán)重OIIRR的措施之一，但是由于OIIRR的影響因素很多，機制比較復(fù)雜，在正畸矯治中如何有效的預(yù)防嚴(yán)重O