機(jī)械應(yīng)力刺激對成牙骨質(zhì)細(xì)胞BSP-OPN mRNA表達(dá)影響的體外研究.pdf

1、正畸牙移動過程中，在牙槽骨發(fā)生活躍骨吸收和骨形成的同時，也存在牙骨質(zhì)的吸收和修復(fù)，成牙骨質(zhì)細(xì)胞在這個過程中具有重要意義。正常情況下，位于牙骨質(zhì)表面的成牙骨質(zhì)細(xì)胞可以抵抗破骨細(xì)胞的粘附，從而避免牙根吸收；在已吸收的牙根表面，成牙骨質(zhì)細(xì)胞分泌形成新的牙骨質(zhì)樣組織對其進(jìn)行修復(fù)。當(dāng)牙根吸收與修復(fù)的平衡被打破后，牙根吸收發(fā)生。正畸牙移動過程中的牙根吸收，由于其存在的廣泛性，不可預(yù)見性等特點(diǎn)，成為目前研究的熱點(diǎn)。許多研究試圖尋找正畸力作用下牙根吸收

2、和修復(fù)的發(fā)生機(jī)制，已取得一定的成果，但仍未清楚。 已往對牙移動過程中牙根吸收和修復(fù)的研究多集中在組織形態(tài)學(xué)上的觀察，而對成牙骨質(zhì)細(xì)胞的研究又多集中在牙根發(fā)育過程和牙周組織的再生工程中，關(guān)于機(jī)械應(yīng)力作用下成牙骨質(zhì)細(xì)胞功能變化的研究還未見報道。本課題通過研究機(jī)械應(yīng)力刺激對成牙骨質(zhì)細(xì)胞重要的礦化相關(guān)基因-骨涎蛋白(Bone sialoprotein BSP)和骨橋蛋白(0steopontin OPN)表達(dá)的影響，有助于從細(xì)胞力學(xué)和分子

3、生物學(xué)水平上進(jìn)一步了解正畸牙移動過程中牙根吸收和修復(fù)的發(fā)生機(jī)制。 本課題利用四點(diǎn)彎曲細(xì)胞力學(xué)加載裝置，以體外培養(yǎng)的成牙骨質(zhì)樣細(xì)胞OCCM-30為研究對象，運(yùn)用實(shí)時熒光定量PCR(real-time fluorescentauantitativePCR，F(xiàn)Q-PCR)技術(shù)，研究了不同性質(zhì)、不同強(qiáng)度、不同作用時間的應(yīng)力應(yīng)變對成牙骨質(zhì)細(xì)胞礦化相關(guān)基因BSP/OPN mRNA表達(dá)的影響。從細(xì)胞力學(xué)和分子生物學(xué)水平對正畸力作用下成牙骨質(zhì)細(xì)

4、胞的功能變化與牙根吸收和修復(fù)的關(guān)系進(jìn)行了初步揭示，為進(jìn)一步闡明牙根吸收和修復(fù)的機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出以下結(jié)論： 1.2000、4000μstrain的張應(yīng)力和壓應(yīng)力在四個時間點(diǎn)都抑制成牙骨質(zhì)細(xì)胞BSPmRNA的表達(dá)，4000μstrain力值比200011strain力值對成牙骨質(zhì)細(xì)胞BSP mRNA表達(dá)的抑制作用更強(qiáng)。表明機(jī)械張、壓應(yīng)力刺激均抑制成牙骨質(zhì)細(xì)胞礦化功能，抑制的強(qiáng)弱與應(yīng)力的大小和加載時間有關(guān)。

5、2.2000、4000μstrain的壓應(yīng)力在作用初期促進(jìn)成牙骨質(zhì)細(xì)胞OPN mRNA的表達(dá)，12h后表現(xiàn)為抑制作用。2000μstrain和4000μstrain的張應(yīng)力抑制OPN mRNA的表達(dá)，抑制作用隨著加載時間的延長而增強(qiáng)。表明機(jī)械應(yīng)力刺激可以調(diào)節(jié)成牙骨質(zhì)細(xì)胞OPN mRNA的表達(dá)，進(jìn)而可能影響成牙骨質(zhì)細(xì)胞的礦化功能和破牙骨質(zhì)細(xì)胞的粘附能力。 綜上所述，成牙骨質(zhì)細(xì)胞是力學(xué)敏感性細(xì)胞，機(jī)械應(yīng)力刺激可以調(diào)節(jié)成牙骨質(zhì)細(xì)胞。B