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1、高效液相色譜(HPLC)法是分離手性物質(zhì)的一種快速、有效的方法。其中,手性固定相(CSP)特別是Pirkle型(刷型)手性固定相常用于HPLC中的手性分離,近年來已廣泛應(yīng)用于手性藥物或中間體的制備分離以及手性藥物光學(xué)純度的測定。 Pirkle型CSP能夠分離的物質(zhì)較多,但是由于其結(jié)構(gòu)特點(diǎn),仍有局限性。為了擴(kuò)大分離范圍,本文利用柱前衍生化與手性固定相HPLC法相結(jié)合的原理,根據(jù)CSP的特點(diǎn),對手性藥物進(jìn)行柱前衍生化,使兩個對映體的
2、衍生物與CSP發(fā)生的相互作用差別更大,從而使兩個對映體的衍生物在CSP上得到很好的分離。利用這種方法,一些原來在選用的CSP上不能手性分離的物質(zhì),如2-羥基酸(扁桃酸)、α-苯乙胺等,其衍生物得到了很好的分離效果。采用的衍生化法是生成酰胺基團(tuán),這些衍生化方法簡單快速穩(wěn)定,消旋化現(xiàn)象少,衍生試劑選擇范圍廣泛,具有很好的實(shí)用性。 本文采用正相HPLC條件對手性物質(zhì)進(jìn)行分離。在分離手性物質(zhì)的過程中,影響分離的主要因素有流動相組成、柱溫
3、等。本文以正己烷為基本成分的流動相,分別考察了添加極性劑如異丙醇、乙醇等對分離的影響;還適當(dāng)添加乙酸類物質(zhì)來改善色譜峰形;還通過改變柱溫等條件使手性物質(zhì)在Pirkle型CSP上得到最優(yōu)分離。結(jié)合相應(yīng)的色譜分離熱力學(xué)函數(shù),對對映體拆分機(jī)理進(jìn)行了深入地探討并給出了一些藥物對映體分子與手性固定相分子的手性識別模型。 本文利用手性對映體光學(xué)純度的定義公式,又利用高效液相色譜中色譜峰面積與物質(zhì)的量成正比的原理,實(shí)現(xiàn)了高效液相色譜對手性藥物
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