禽用益生菌的分離鑒定、酶的性質(zhì)研究及其初步應(yīng)用.pdf

1、濫用抗生素已經(jīng)成為當(dāng)今畜牧業(yè)的一個(gè)重大問(wèn)題，科研工作者正努力尋找抗生素的替代品。益生菌是一種非致病性的微生物，是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新型飼料添加劑。大量實(shí)踐及研究表明，多種芽孢桿菌對(duì)動(dòng)物正常生理狀態(tài)的維持和生長(zhǎng)都有重要意義，是益生菌菌種開(kāi)發(fā)的重要來(lái)源。 該研究依據(jù)常規(guī)的酶活測(cè)定法，從微生態(tài)制劑、健康雛雞的腸道和土壤中分離篩選出三株菌(B、N和WS-3L)作為益生菌的有用添加菌。用針對(duì)細(xì)菌域通用引物，特異性擴(kuò)增細(xì)菌的16SrDNA

2、片段，對(duì)菌株進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定，分別為蠟樣芽孢桿菌、乳酸桿菌和地衣芽孢桿菌。同時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基優(yōu)化試驗(yàn)，初步確定其最佳培養(yǎng)基為l％豆餅粉，0.5％魚(yú)粉，0.5％玉米淀粉，0.5％半乳.甘露糖，0.5％NaCl。 同時(shí)，該試驗(yàn)還對(duì)芽孢桿菌WS-3L菌株產(chǎn)生的微生物酶(α-淀粉酶)的性質(zhì)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，產(chǎn)生的a.淀粉酶Amy[，經(jīng)過(guò)多步純化，酶的回收率為15.5％，比活提高了345倍。該酶的最適反應(yīng)溫度為45℃，最適反

3、應(yīng)pH為6.5，在pH7.0～8.0，40℃以下酶活較穩(wěn)定；離子Cu<'2+>、NH<,4><'+>、Ag<'+>、Hg<'+>、EDTA和SDS對(duì)酶活力有顯著抑制作用，而其他一些常見(jiàn)金屬離子如Na<'+>、K<'+>則對(duì)酶活影響不大。玉米淀粉對(duì)AmyL有很高的吸附率，預(yù)示這可以作為快速固定該酶的一個(gè)簡(jiǎn)易方法應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中。 通過(guò)設(shè)計(jì)雛雞試驗(yàn)，將三株益生菌(B、N和WS-3L)和其產(chǎn)生的酶作為一種新的添加劑使用，對(duì)蛋雛雞的生長(zhǎng)