巨噬細胞移動抑制因子(MIF)對魚炎癥疾病作用研究.pdf

1、隨著養(yǎng)殖大黃魚（Larimichthys crocea）和青石斑魚（Epinephelus awoara）規(guī)模的擴大，各種傳染性疾病日益頻繁，其中溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）和刺激隱核蟲（Cryptocaryon irritans）均能引起養(yǎng)殖魚類疾病，給魚類養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴重的經(jīng)濟損失。巨噬細胞移動抑制因子(MIF)作為一種重要的促炎癥反應(yīng)介質(zhì)在魚類的多

2、種炎癥中發(fā)揮了重要作用。本研究以我國主要海洋經(jīng)濟魚類大黃魚和青石斑魚為研究對象，檢測了健康魚和患病魚組織中的巨噬細胞移動抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)表達。結(jié)果如下：
　　一、通過免疫組化技術(shù)檢測了MIF在溶藻弧菌病和刺激隱核蟲病的大黃魚不同組織中的表達量。結(jié)果表明MIF在健康大黃魚頭腎、脾、腸、肝臟各組織中均無表達；在患溶藻弧菌病大黃魚頭腎、脾、腸組織中的陽性率分

3、別為92％、64%、56%；MIF在患刺激隱核蟲病大黃魚頭腎、脾、腸、肝組織中的陽性率分別為90%、86%、54%、25%。MIF表達陽性率差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。MIF表達陽性，染色強度為不同程度的黃色至棕褐色顆粒?？梢奙IF在大黃魚發(fā)病中發(fā)揮重要作用。
　　二、應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附ELISA測定溶藻弧菌病、副溶血弧菌病和刺激隱核蟲病的大黃魚和青石斑魚不同組織中MIF與TNF-a、IL-1表達的相關(guān)性。結(jié)果表明，患病魚各

4、組織中MIF、TNF-α、IL-1的濃度與健康對照組相比均有不同程度增高，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　三、用溶藻弧菌和副溶血弧菌感染青石斑魚，采用實時熒光定量 PCR技術(shù)檢測 MIF在其各組織中的表達水平。結(jié)果顯示MIF在患病魚各個組織器官中的表達量均顯著高于健康對照組，且在頭腎、肝臟、脾臟、腦中的表達量顯著高于其他組織。通過多重序列比對分析青石斑魚MIF的cDNA序列，發(fā)現(xiàn)MIF的氨基酸序列與條石鯛（Oplegna