巨噬細胞移動抑制因子對結腸癌細胞增殖和血管形成的影響.pdf

1、目的：近年來有研究表明MIF在許多腫瘤中都有較高的表達，并有可能參與腫瘤的血管生成、增殖和遷移。但其具體機制目前還未完全闡明。本實驗旨在觀察抗MIF抗體(Anti-MIF)對結腸癌細胞株HCT-116增殖的影響并通過檢測VEGF在細胞的表達探討其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用。 方法：MTT比色分析法檢測Anti-MIF對HCT-116細胞的增殖影響，流式細胞儀檢測經Anti-MIF處理后HCT-116細胞周期的變化。免疫組織化學方法

2、及蛋白印跡(western-blot)法檢測經Anti-MIF處理后細胞中血管內皮細胞生長因子(VEGF)的表達。 結果：100、200、400、800μg/L Anti-MIF在不同時間段處理HCT-116細胞后，24h組其細胞抑制率分別為(1.02％，3.90％，8.62％，15.28％)，48h組抑制率(2.16％，6.83％，18.24％，38.20％)，72h組抑制率(5.09％，12.92％，33.91％，53.56

3、％)。細胞增殖明顯受到抑制，呈時間-劑量依賴性特點。尤以72h組最為顯著，分別跟Oμg/L，組比較均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且組內兩兩比較均具有顯著性差異(P＜0.01)；100、200、400、800μg/L，Anti-MIF處理HCT-116細胞72h后，流式細胞儀細胞周期分析表明G0/G1期細胞百分率上升，S期和G2/M期細胞百分率下降。以800μg/L組最為顯著，G0/G1期、S期和G2/M期分別跟0μg/L組比較均有統(tǒng)計

4、學意義(P＜0.05)；Anti-MIF對細胞中VEGF的表達有明顯抑制作用，其表達隨著Anti-MIF劑量的增加而減少。Anti-MIF 100、200、400、800μg/L組作用72h后，VEGF蛋白表達分別為(20567.48±1522.19，7188.03±1011.59，13920.21±1305.72，13256。5±1266.09和11845.62±1071.20)，與0μg/L組比較，均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。