熊果酸納米粉針劑對腫瘤血管生成作用的影響.pdf

1、目的：熊果酸（Ursolic Acid）是廣泛存在于自然界的一種具有抗炎抗腫瘤效應(yīng)的三萜類化合物，其確切的療效及較低的毒性引起藥物工作者的廣泛關(guān)注，但其抗腫瘤作用的機(jī)制仍待完善。血管生成是腫瘤發(fā)生發(fā)展中的重要環(huán)節(jié)，以血管生成中的關(guān)鍵步驟作為藥物靶點(diǎn)已成為最新的研究熱點(diǎn)之一。UA在體內(nèi)雞胚絨毛膜實(shí)驗(yàn)中抑制血管生成的表現(xiàn)，提示了它成為抗血管抗腫瘤藥物的潛能，本文以重要的血管生長因子VEGF為靶點(diǎn)，從多角度研究UA對它的調(diào)節(jié)作用，進(jìn)一步研究U

2、A的抗血管生成機(jī)制。
　　 方法：在二氯化鈷(CoCl2)誘導(dǎo)的缺氧微環(huán)境條件下培養(yǎng)肝癌HepG2細(xì)胞，用不同濃度熊果酸(Ursolic Acid，UA)納米粉針劑水溶液作用于細(xì)胞，用熒光定量(Real-time PCR)和ELISA技術(shù)檢測UA作用前后VEGF在mRNA及蛋白水平的表達(dá)變化。同時(shí)用HepG2細(xì)胞建立裸鼠皮下移植瘤，腹腔注射UA納米粉針劑水溶液，并設(shè)立對照。用Western Blot技術(shù)檢測試驗(yàn)組與對照組VEGF

3、在蛋白水平的表達(dá)變化，并計(jì)算移植瘤抑制率。另外對裸鼠移植瘤制作HE切片和透射電鏡切片，以阿霉素為陽性對照，設(shè)立時(shí)間梯度，觀察UA的體內(nèi)抑瘤情況。
　　 結(jié)果：在UA作用下，HepG2細(xì)胞VEGF mRNA水平呈劑量依賴性下調(diào)，而VEGF蛋白表達(dá)則呈劑量依賴性上調(diào)；腹腔注射UA納米粉針劑水溶液2周后，HepG2細(xì)胞裸鼠移植瘤生長較緩，而腫瘤組織VEGF蛋白表達(dá)為生理鹽水對照組的(3.11±0.55)倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0