辛伐他汀通過(guò)上調(diào)SIRT1抵抗血管內(nèi)皮細(xì)胞衰老.pdf

1、背景：衰老是機(jī)體對(duì)內(nèi)外環(huán)境多重因素的反應(yīng)，在輻射，缺氧，過(guò)氧化，高糖，高血脂等情況都可以導(dǎo)致衰老。衰老通常伴隨動(dòng)脈粥樣硬化同時(shí)發(fā)生。OX-LDL是衰老的重要因素，OX-LDL增高可以增加內(nèi)皮祖細(xì)胞的衰老，在人體內(nèi)，隨著年齡的增加，OX-LDL逐漸增加，抑制OX-LDL能降低細(xì)胞衰老，因此降低OX-LDL濃度或者拮抗OX-LDL作用具有抗衰老作用。衰老的標(biāo)志物很多，如端粒酶，β-半乳糖苷酶，SIRT1基因等。其中SIRT1在基因沉默，抵抗

2、應(yīng)激，延長(zhǎng)壽命等方面發(fā)揮重要作用，很多研究表明SIRT1基因在調(diào)節(jié)衰老中發(fā)揮重要的作用，敲除SIRT1可能導(dǎo)致動(dòng)物衰老。SIRT1與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老密切相關(guān)，敲除SIRT1或者抑制SIRT1活性可以誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮衰老表象，過(guò)表達(dá)SIRT1人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞可以抵抗H2O2誘導(dǎo)的衰老。辛伐他汀廣泛用于臨床，具有抗炎，抗氧化，抗動(dòng)脈硬化，保護(hù)內(nèi)皮功能，提示了辛伐他汀可能具有經(jīng)由上調(diào)SIRT1抗衰老、改善動(dòng)脈粥樣硬化的作用。
　　

3、 目的：探討辛伐他汀的抗衰老作用及其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞SIRT1表達(dá)的調(diào)節(jié)。
　　 方法：通過(guò)動(dòng)物及細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，老年大鼠(60周齡)16只隨機(jī)分為兩組，一組給予口服辛伐他汀5mg/kg/d，藥物磨成粉混入食物，一組正常飲食。另外一組青年大鼠(10周齡)8只正常飲食做對(duì)照組。各實(shí)驗(yàn)組正常飼養(yǎng)16周后檢測(cè)老年大鼠組(n=8)、老年大鼠口服辛伐他汀組(n=8)及青年大鼠組(n=8)血漿OX-LDL濃度，腹主動(dòng)脈及主動(dòng)脈內(nèi)膜β

4、-半乳糖苷酶染色。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中分為2組。(1)OX-LDL組：根據(jù)OX-LDL濃度(0、25、50、100μg/ml)不同分為4個(gè)亞組，各培養(yǎng)24小時(shí)；(2)辛伐他汀組：根據(jù)辛伐他汀濃度不同(0μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)分為4個(gè)亞組，每個(gè)亞組先加入不同濃度的辛伐他汀預(yù)處理1小時(shí)，而后再加入100μg/ml的OX-LDL培養(yǎng)23小時(shí)，共24小時(shí)，另加一亞組為空白對(duì)照組。各組檢測(cè)不同濃度下β-半乳糖苷酶染

5、色及SIRT1的表達(dá)。
　　 結(jié)果：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，未經(jīng)治療的老年大鼠相比青年大鼠膽固醇、LDL及OX-LDL顯著增高，經(jīng)過(guò)十六周口服辛伐他汀治療的老年大鼠的血脂水平顯著低于未治療老年大鼠組(膽固醇：103.43±15.14vs.147.25±10.59，P=0.002，LDL：10.36±1.47vs.12.21±1。48，P=0.008，OX-LDL：18.45±2.64vs.25.06±2.53，P=0.001)，老年大鼠主動(dòng)

6、脈內(nèi)皮β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性細(xì)胞百分比顯著高于青年大鼠(83.67±9.50％vs.22.00±2.65％，P<0。001)，同時(shí)服用辛伐他汀老年大鼠相比未服藥老年大鼠組顯著降低了染色陽(yáng)性細(xì)胞百分比(68.83±7.47％vs.83.67±9.50％，P=0.001)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，OX-LDL組隨著OX-LDL濃度的增加，β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增加，表明細(xì)胞的衰老程度在增加。在OX-LDL(100ug/ml)組達(dá)到最大(P<0

7、.001)。其中高濃度OX-LDL組，相比空白組、低濃度組SIRT1蛋白表達(dá)明顯下降(P=0.001)。辛伐他汀實(shí)驗(yàn)組中，辛伐他汀10μmol/L組能明顯抵抗OX-LDL誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老(P<0.001)，并顯著抑制OX-LDL誘導(dǎo)的SIRT1表達(dá)下降(P<0.001)，且成濃度依賴性。
　　 結(jié)論：辛伐他汀處理后可以明顯減輕動(dòng)脈內(nèi)皮衰老，阻斷OX-LDL誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞SIRT1表達(dá)下降，改善臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老。從而在體內(nèi)