益生菌對硫代乙酰胺誘導肝纖維化程度的改善作用研究.pdf

1、研究背景：
　　 肝纖維化是指由各種致病因子所致肝內結締組織異常增生，導致肝內彌漫性細胞外基質過度沉積的病理過程，其發(fā)展的最終結果即肝硬化。研究已經(jīng)表明，在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過程中，腸源性內毒素血癥(Intestinal endotoxemia，IETM)起了重要的促進作用，導師劉立新的前期研究發(fā)現(xiàn)，硫代乙酰胺（Thioacetamide，TAA）在引起大鼠肝損傷的同時出現(xiàn)IETM，其所致肝損傷動物模型與人類肝損傷的特點更相符，

2、更能反映人類肝損傷的實際情況。據(jù)文獻報道，益生菌制劑培菲康（雙歧三聯(lián)活菌膠囊）可調節(jié)腸道菌群，扶持厭氧菌生長，減少有害菌比例，從而減少腸腔內毒素的產(chǎn)生，已經(jīng)在臨床上廣泛應用。有資料表明，微生態(tài)制劑整腸生（地衣芽孢桿菌活菌膠囊）為兼性厭氧菌，在有氧的狀態(tài)下能迅速消耗環(huán)境中的游離氧，產(chǎn)生強大的生物奪氧作用，促進厭氧菌的生長，代謝過程中產(chǎn)生抗菌活性物質，在臨床上主要用于腹瀉患者的治療，但其在改善肝纖維化程度方面的研究卻很少有報道。本研究通過給

3、TAA誘導肝纖維化大鼠益生菌制劑培菲康和整腸生，研究培菲康和整腸生對肝纖維化的影響和作用，探討整腸生對肝纖維化程度的影響。
　　 目的：
　　 探討整腸生是否能通過降低腸源性內毒素血癥而起到改善肝纖維化程度的作用。
　　 方法：
　　 將50只SPF級雄性SD大鼠隨機分為正常對照組、TAA模型組、培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組。采用TAA誘導大鼠肝纖維化，HE染色和苦味酸－天狼猩紅染色觀察大鼠肝

4、損傷和膠原纖維沉積情況；同時測定血漿內毒素水平、血清丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶(aspartate aminotransferase，AST)、乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)水平；對肝組織膠原纖維面積百分比（苦味酸—天狼猩紅染色）和血漿內毒素水平進行相關性分析。
　　 結果：

5、
　　 (1)血漿內毒素水平：與正常對照組相比，TAA模型組大鼠血漿內毒素水平顯著升高（P＜0.01）；與TAA模型組相比，培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠血漿內毒素水平顯著降低（P＜0.05）。
　　 (2)血清ALT、AST、LDH水平：與正常對照組相比，TAA模型組大鼠血清ALT、AST、LDH水平顯著升高(P＜0.05)；與TAA模型組相比，培菲康組大鼠血清ALT、AST、LDH水平顯著降低（P＜0.

6、05），整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠血清AST、LDH水平顯著降低(P＜0.05)，ALT水平?jīng)]有降低(P＞0.05)。
　　 (3)血清MDA水平：與正常對照組相比，TAA模型組大鼠血清MDA水平顯著升高(P＜0.05)；與TAA模型組相比，培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠血清MDA水平顯著降低(P＜0.05)。
　　 (4)HE染色：與正常對照組相比，TAA模型組大鼠肝小葉正常結構被破壞，肝細胞索排

7、列紊亂，中央靜脈周圍可見片狀壞死及大量炎性細胞浸潤，并且有纖維隔形成，肝纖維化明顯形成(P＜0.01)；與TAA模型組相比，培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組大鼠肝小葉正常結構存在，肝細胞有少量壞死，炎性細胞浸潤較少，肝纖維化程度明顯改善(P＜0.05)。
　　 (5)苦味酸．天狼猩紅染色：與正常對照組相比，TAA模型組大鼠肝組織見大量紅色的膠原纖維，并且有假小葉形成，肝纖維化明顯形成(P＜0.05)；與TAA模型組相比，