應(yīng)激對(duì)家禽大麻素受體信號(hào)的影響研究.pdf

1、為探討CB1受體信號(hào)通路在應(yīng)激調(diào)控食欲過(guò)程中起到的作用，本課題進(jìn)行了以下研究。
　　本研究通過(guò)測(cè)定不同日齡家禽各組織中CB1受體的表達(dá)量，研究CB1受體的時(shí)空分布。選擇體重相近的7，21和35日齡的肉仔雞和7日齡蛋公雛各8只，采集下丘腦，肝臟，十二指腸，空腸，回腸。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在7，21和35日齡的肉仔雞和7日齡蛋公雛中，CB1受體在下丘腦中的表達(dá)量均遠(yuǎn)高于其他外周組織，且下丘腦中CB1受體的表達(dá)量隨日齡的增加而顯著增加，在7日

2、齡時(shí)，肉仔雞和蛋公雛各組織中CB1受體的表達(dá)量并不存在差異。
　　本研究通過(guò)熱應(yīng)激和糖皮質(zhì)激素DEX處理，研究應(yīng)激時(shí)CB1受體及相關(guān)基因表達(dá)的變化情況。熱應(yīng)激試驗(yàn):選擇體重相近的28日齡雄性AA肉仔雞144只，分為四組（10h熱應(yīng)激組，10h對(duì)照組，72h熱應(yīng)激組，72h對(duì)照組），每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6只雞。DEX試驗(yàn):選擇體重相近的28日齡雄性AA肉仔雞144只，分為四組(24hDEX組、24h對(duì)照組，72h DEX組，72h

3、對(duì)照組)，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6只雞。試驗(yàn)結(jié)果顯示，應(yīng)激（熱應(yīng)激和DEX處理）可導(dǎo)致采食量和體增重的顯著降低，肛溫的顯著升高。熱應(yīng)激時(shí)，肉仔雞下丘腦中GR mRNA表達(dá)量顯著增加，AMPKα1mRNA表達(dá)量顯著降低，AMPK磷酸化水平降低。DEX處理時(shí)，肉仔雞下丘腦中GR、AMPKα2、LKB1、CB1受體mRNA的表達(dá)量顯著升高，AMPK磷酸化水平升高。說(shuō)明，糖皮質(zhì)激素可以激活CB1受體和AMPK信號(hào)通路，從而調(diào)控了食欲，能量代謝和

4、平衡。
　　本研究通過(guò)腦室注射CB1受體激活劑ACEA和拮抗劑SR141716，研究CB1受體對(duì)AMPK信號(hào)通路的影響。兩個(gè)試驗(yàn)均選擇體重165g左右的7日齡肉仔雞40只進(jìn)行腦室埋管，恢復(fù)至10日齡進(jìn)行腦室注射，腦室注射SR141716分為DMSO組，0.1，1，2ugSR141716組，腦室注射ACEA分為DMSO組，0.5，1，2ug ACEA組，每半小時(shí)統(tǒng)計(jì)采食量。根據(jù)結(jié)果分別選擇1ug SR141716和2ug ACEA為

5、最佳注射劑量，1h和3h為最佳采樣時(shí)間，進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，腦室注射SR141716使肉仔雞采食量下降，下丘腦中CB1受體、AMPKα2、CART mRNA表達(dá)量顯著升高，AgRP、POMCmRNA表達(dá)量顯著降低。說(shuō)明，抑制CB1受體可通過(guò)降低促食欲基因AgRP的表達(dá)，升高抑食欲基因CART的表達(dá)，抑制家禽食欲。腦室注射ACEA可增加肉仔雞的采食量，降低了其下丘腦中CB1受體、POMC mRNA的表達(dá)水平，升高了AgRP的mRN