神經(jīng)病理性疼痛大鼠大麻素Ⅱ型受體介導的抗傷害作用及受體表達的研究.pdf

1、[背景]神經(jīng)病理性疼痛(Neuropathic Pain)是由于神經(jīng)系統(tǒng)的原發(fā)損傷或功能障礙而引起的疼痛。目前發(fā)病機制不清，藥物治療效果不佳，缺乏有效的治療措施，是困擾臨床的一個挑戰(zhàn)性課題。造成這種結局的一個重要原因是治療神經(jīng)病理性疼痛的藥物的副作用尤其是其中樞神經(jīng)系統(tǒng)副作用限制了藥物的劑量，從而不能達到有效的鎮(zhèn)痛和治療作用。因而，探尋神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)病機制，尋求作用于脊髓或外周部位、不具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)副作用的藥物，顯得尤為迫切。CB

2、2大麻素受體主要表達于外周免疫細胞，有研究表明CB2受體選擇性激動劑能夠抑制急性、炎性疼痛而不產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)副作用，但對于其在神經(jīng)病理性疼痛中的作用研究較少，同時對于CB2受體是否表達于脊髓和背根神經(jīng)節(jié)(DRG)，存在不同的報道，這些均需進一步驗證。 [目的]觀察選擇性CB2受體激動劑AM1241對神經(jīng)病理性疼痛的效果；并檢測神經(jīng)病理性疼痛形成過程中脊髓背角、DRG部位CB2受體表達的變化，探討其治療作用的分子機制。

3、[方法]第一部分雄性S-D大鼠36只，隨機分為6組(n=6)：①CCI+安慰劑組，坐骨神經(jīng)慢性緊縮模型(CCI)建立后10天(下同)，腹腔注射安慰劑；②CCI+AM1241低劑量組，腹腔注射AM1241，劑量為100 μg/kg；③CCI+AM1241中劑量組，AM1241劑量為300 μ g/kg； ④CCI+AM1241高劑量組，AM1241劑量為1000 μ g/kg；⑤CCI+AM1241高劑量+AM630組，腹腔注射AM1

4、241和選擇性CB2受體拮抗劑AM630，劑量分別為1000 μg/kg和300 μg/kg；⑥CCI+AM1241高劑量+AM251組，腹腔注射AM1241和選擇性CB1受體拮抗劑AM251，劑量分別為1000μg/kg和300μg/kg。CCI模型采用慢性坐骨神經(jīng)結扎的方法建立。坐骨神經(jīng)結扎前后以及藥物治療前后，分別用vonFrey纖毛刺激針測量機械性痛閾。第二部分雄性S-D大鼠42只，隨機分為7組(n=6)：①Con組，對照組；②

5、S3組，假手術術后3天組；⑧C3組，CCI術后3天組；④S7組，假手術術后7天組；⑤C7組，CCI術后7天組；⑥SD14組，假手術術后14天組；⑦C14組，CCI術后14天組。CCI模型采用慢性坐骨神經(jīng)結扎的方法建立，假手術組僅顯露坐骨神經(jīng)，并不進行結扎。用von Frey纖毛刺激針測量各組大鼠機械性痛閾后處死大鼠，取手術側腰膨大脊髓背角和L4、L5背根神經(jīng)節(jié)標本，采用免疫蛋白印跡技術，從蛋白質水平研究神經(jīng)病理性疼痛形成過程中CB2受體

6、表達的變化。 [結果]CCI導致手術側后爪的機械痛閾閾值降低(P<0.05)；AM1241劑量依賴性地抑制CCI引起的機械異常痛敏(P<0.05)；AM1241的作用可完全為選擇性CB2受體拮抗劑AM630所阻斷(P<0.05)，而不受選擇性CB1受體拮抗劑AM251的影響(P>0.05)。各組大鼠脊髓和背根神經(jīng)節(jié)部位均有CB2受體的表達；與對照組相比，CCI后7天、14天組脊髓背角CB2受體均發(fā)生上調(P<0.05)，CCI后