miR-711對(duì)SGC-7901細(xì)胞周期G1期的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：在前期研究的基礎(chǔ)上，本課題主要研究miR-711對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901細(xì)胞周期的影響。
　　方法：體外培養(yǎng)SGC-7901細(xì)胞，將miR-711過表達(dá)載體（miR-711-mimics）、miR-711抑制表達(dá)載體（miR-711-inhibitor）及空質(zhì)粒（NC）轉(zhuǎn)染至SGC-7901細(xì)胞，即實(shí)驗(yàn)分為四組：miR-711-mimics、miR-711-inhibitor、空質(zhì)粒組（NC）及空白對(duì)照組(Control

2、)。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法驗(yàn)證轉(zhuǎn)染后各組中miR-711的表達(dá)情況，通過MTT、流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，分析其與SGC-7901細(xì)胞周期的相關(guān)性，Western Blots檢測(cè)CyclinD1、CDK4蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：將miR-711-mimics、miR-711-inhibitor及空質(zhì)粒組（NC）轉(zhuǎn)染至SGC-7901細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染72小時(shí)后，通過熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)，測(cè)得轉(zhuǎn)染效率達(dá)75％以上，qRT-PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組中 m

3、iR-711的相對(duì)表達(dá)量，結(jié)果顯示 miR-711-mimics組、miR-711-inhibitors及NC組中的miR-711表達(dá)量分別是空白對(duì)照組的168.31倍、0.269倍、0.998倍；MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，miR-711-mimics組細(xì)胞培養(yǎng)24h、48h、72h后，其細(xì)胞增殖抑制率隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加（P<0.05），miR-711-inhibitor組其細(xì)胞增殖抑制率隨著時(shí)間延長(zhǎng)而降低（P<0.05），NC組與空白轉(zhuǎn)染

4、組比較無顯著性差異（P>0.05）；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示miR-711-mimics組與其他3組相比較，轉(zhuǎn)染72h后的SGC-7901細(xì)胞顯著抑制在G1期（P<0.05）；Western Blot檢測(cè)顯示 miR-711-mimics組 CyclinD1、CDK4的表達(dá)量與其余組比較明顯降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：miR-711能抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖，其機(jī)制可能與下調(diào)CyclinD1、CDK4的表達(dá)，使細(xì)胞周期阻