2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察As<,2>O<,3>與Aspirin單獨及聯(lián)合應(yīng)用對人胃癌SGC-7901細胞抑制生長、誘導凋亡的生物學效應(yīng),探討As<,2>O<,3>與Aspirin兩種藥物是否具有協(xié)同抗癌效應(yīng),聯(lián)合應(yīng)用是否可以降低兩藥的用量,初步探討As<,2>O<,3>與Aspirin抑制胃癌生長的可能機制,為臨床用藥提供實驗和理論依據(jù)。 方法:細胞培養(yǎng):人胃癌SGC-7901細胞常規(guī)培養(yǎng)于含有10%新生牛血清、100U/ml青霉素和100μ

2、g/ml鏈霉素的RPMI 1640培養(yǎng)液中,在37℃,5%CO<,2>及飽和濕度培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng)。將As<,2>O<,3>與Aspirin用培養(yǎng)液稀釋成終濃度為As<,2>O<,3>(1、2、4、8μmol/L);Aspirin(0.5、1、2、4mmol/L)以及兩者聯(lián)合終濃度As<,2>O<,3>(2μmol/L)+Aspirin(1mmol/L),As<,2>O<,3>(2μmol/L)+Aspirin(0.5mmol/L),As

3、<,2>O<,3>(1μmol/L)+-Aspim(1mmol/L),作用于SGC-7901細胞后72小時,采用MTT法檢測兩藥單獨及聯(lián)合應(yīng)用后腫瘤細胞生長抑制率(IR);流式細胞術(shù)(FCM)檢測腫瘤細胞凋亡及細胞周期的改變;HE染色、光學顯微鏡觀察細胞形態(tài)學改變;免疫細胞化學染色(SP法)檢測信號轉(zhuǎn)導分子IKKα、COX-2、VEGF及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax的表達:Western blot檢測IKKα、IкBα、NF-кB、C

4、OX-2、VEGF蛋白表達的改變。 結(jié)果: 1.As<,2>O<,3>及Aspirin均可抑制胃癌細胞SGC-7901的生長,兩藥單獨作用于SGC-7901細胞后48小時,8μmol/L As<,2>O<,3>組及4mmol/L Aspirin組細胞生長抑制率分別為40.56%、20.41%,與陰性對照組相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);作用后72小時,4μmol/LAs<,2>O<,3>組(31.04%)及2m

5、mol/L Aspirin組(16.11%)與陰性對照組相比,抑制率的差異亦具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);2μmol/LAs<,2>O<,3>+1mmol/L Aspirin聯(lián)合用藥組的生長抑制率為24.19%,與陰性對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),并且與2μmol/L As<,2>O<,3>(5.96%)及1mmol/L Aspirin(4.86%)單用藥組相比,抑制率的差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);后兩組單用藥

6、組與對照組的差異無統(tǒng)計學意義。 2.FCM檢測結(jié)果顯示陰性對照組SGC-7901細胞的凋亡率(AR)是1.55%,2μmol/L As<,2>O<,3>組、1mmol/L Aspirin組及2μmol/LAs<,2>O<,3>與1mmol/L Aspirin聯(lián)合應(yīng)用組的AR分別是1.81%、1.64%、19.01%,2μmol/LAs<,2>O<,3>組和1mmol/L Aspirin組與陰性對照組AR的差異無統(tǒng)計學意義;而2μ

7、mol/LAs<,2>O<,3>與1mmol/L Aspirin聯(lián)合應(yīng)用組的AR與陰性對照組、2μmol/L As<,2>O<,3>組及1mmol/L Aspirin組相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);4μmol/L As<,2>O<,3>將SGC-7901細胞的細胞周期阻滯在G<,2>/M期,2mmol/L Aspirin使其阻滯在G<,0>/G<,1>期,聯(lián)合用藥組細胞G<,0>/G<,1>期、G<,2>/M期比例均增加,S

8、期細胞比例減少。 3.隨著實驗組給藥濃度的增加或聯(lián)合應(yīng)用兩藥,HE染色觀察到細胞變小變圓,有凋亡小體形成,胞漿中出現(xiàn)空泡,部分細胞脫落漂浮于培養(yǎng)基中,隨藥物劑量增大,作用時間延長,上述現(xiàn)象越加明顯。 4.免疫細胞化學染色結(jié)果顯示:隨著藥物濃度的增加,胃癌細胞中IKK、COX-2、VEGF的表達率逐漸減少;Bax的表達率逐漸增高,Bcl-2表達率逐漸減少,2μmol/L As<,2>O<,3>+1mmol/L Aspiri

9、n聯(lián)合用藥組與陰性對照組、2μmol/L As<,2>O<,3>組及1mmol/L Aspirin組相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 5.Western blot檢測結(jié)果顯示As<,2>O<,3>與Aspirin作用后,胃癌細胞總蛋白中IKKα、COX-2、VEGF蛋白的含量降低;非磷酸化IкBα蛋白的含量增高,核蛋白中NF-кB的含量均降低。2μmol/L As<,2>O<,3>+1mmol/L Aspirin聯(lián)合用

10、藥組與陰性對照組、2μmol/LAs<,2>O<,3>組及1mmol/L Aspirin組相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結(jié)論 1.As<,2>O<,3>與Aspirin聯(lián)合應(yīng)用具有較明顯的協(xié)同作用,聯(lián)合應(yīng)用可以降低兩藥的用量。 2.As<,2>O<,3>與Aspirin均可通過抑制Bcl-2的表達、促進Bax的表達,升高Bax/Bcl-2比率,抑制SGC-7901細胞的增殖,促進其凋亡。 3

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