青藤堿對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞EMT的作用機(jī)制研究.pdf

1、學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名：s 、院霞導(dǎo)師簽章：1 宋沫＆莒二級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章：’f 許l I河北醫(yī)科

2、大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：麥4 之霞 導(dǎo)師簽章：束淑雷3 - o I 侔f 1 月中文摘要青藤堿對(duì)人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞E M T 的作用機(jī)制研究摘 要目的：研究青藤堿( S I N ) 對(duì)人胃癌細(xì)胞S G C ．7 9

3、0 1 增殖、侵襲以及轉(zhuǎn)移相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的影響。方法：1 細(xì)胞存活率檢測：用不同濃度S I N 處理人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞后，用W S T ．1 法檢測不同處理時(shí)間的細(xì)胞存活率。2M M P 表達(dá)：用不同濃度S I N 處理人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞，E L I S A檢測M M P ．2 和M M P ．9 在細(xì)胞培養(yǎng)基中的含量變化。3 R T ．P C R 檢測不同濃度S I N 對(duì)人胃癌S G

4、C ．7 9 0 1 細(xì)胞相關(guān)E M T 基因m R N A 表達(dá)水平的影響。4W e s t e r nb l o t t i n g 檢測不同濃度S I N 對(duì)人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞相E M T蛋白表達(dá)水平的影響。5 W e s t e r nb l o t t i n g 檢測不同濃度S I N 對(duì)人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞核內(nèi)N F r , Bp 6 5 蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果：1 采用不同濃度

5、的S I N 處理人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞，檢測結(jié)果表明：處理2 4 h 后，1m m o l ／L 、2m m o l ／L 、2 ．5m m o l ／L 和3 m m o l ／L 處理組的細(xì)胞存活率顯著低于對(duì)照組( P < O ．0 5 ) 。處理4 8h 后，O ．5m m o l ／L 、1m m o l ／L 、2m m o l ／L 、2 ．5m m o l ／L 以及3m m o l ／L 處理組

6、的細(xì)胞存活率顯著低于對(duì)照組( P < 0 ．0 5 ) ，且對(duì)青藤堿具有時(shí)間和劑量依賴性。2S I N 處理后，可降低人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞培養(yǎng)基I V [ 1 V [ P s 的含量。各S I N 處理組培養(yǎng)基中M M P ．2 含量顯著低于對(duì)照組( P < O ．0 5 ) ，1m m o l ／L和2 m m o l ／L 處理組的M M P ．9 含量降低( P < O ．0 5 ) 。3R

7、T —P C R 和W e s t e r nB l o t t i n g 結(jié)果表明：隨S I N 濃度升高，各處理組人胃癌S G C ．7 9 0 1 細(xì)胞中M M P ．2 m R N A 、蛋白表達(dá)以及M M P ．9 m R N A表達(dá)豐度均顯著降低( 尸< O ．0 5 ) 。其中0 ．5 m m o l ／L 、1m m o l ／L 和2 m m o l ／L三個(gè)處理組M M P ．9 蛋白表達(dá)也顯著降低( 尸&l