蛇六谷石油醚提取物調(diào)控SGC-7901細(xì)胞周期的分子機(jī)制及其對MAPK信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的：研究中藥蛇六谷經(jīng)系統(tǒng)溶劑法初步提取分離后，所得到的蛇六谷石油醚提取物阻滯體外培養(yǎng)的人胃癌SGC-7901細(xì)胞周期于G0/G1期的分子機(jī)理，以及對MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路（ERK、JNK、P38通路）的影響。
　　方法：采用系統(tǒng)溶劑法，以95％乙醇回流提取蛇六谷，減壓濃縮后，以石油醚多次萃取活性成分，得到蛇六谷石油醚提取物；以光學(xué)顯微鏡直接觀察細(xì)胞形態(tài)法，了解不同濃度梯度蛇六谷石油醚提取物對體外培養(yǎng)的人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖

2、的影響，并選取有效濃度梯度；以Western Blot蛋白印跡法檢測周期調(diào)控分子Cyclin D1、CDK4以及MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路家族ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、P38、p-P38的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：（1）用光學(xué)顯微鏡直接觀察蛇六谷石油醚提取物作用于人胃癌 SGC-7901細(xì)胞24 h后細(xì)胞形態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞逐漸皺縮，細(xì)胞內(nèi)顆粒增多，細(xì)胞膜破裂，細(xì)胞逐步裂解，且這種作用呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性

3、；（2）蛇六谷石油醚提取物抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞Cyclin D1、CDK4的表達(dá)，并隨著藥物濃度的增加，表達(dá)量呈現(xiàn)劑量－效應(yīng)曲線下降；（3）蛇六谷石油醚提取物對人胃癌SGC-7901細(xì)胞ERK、JNK、P38蛋白的表達(dá)無影響，但激活ERK、JNK、P38磷酸化水平，即上調(diào)它們的活化形式（p-ERK、p-JNK、p-P38）的表達(dá)水平，并且隨著濃度的增加，磷酸化水平也隨之上升，尤其高濃度組的表達(dá)量急劇增加。
　　結(jié)論：（1