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文檔簡介
1、目的:
觀察SWI/SNF核心亞單位SNF5對多發(fā)性骨髓瘤(MM)細胞增殖的影響,并探討其作用機制。
方法:
在多發(fā)性骨髓瘤細胞中建立四環(huán)素控制表達SNF5shRNA的穩(wěn)定細胞系,利用四環(huán)素誘導敲低SNF5,生長曲線評估細胞增殖,流式細胞術測定細胞周期,Transwell方法檢測細胞遷移的變化,采用Affimetrix芯片檢測基因表達譜,尋找介導細胞增殖或遷移相關的差異表達基因,并以RT-PCR和Weste
2、rnBlot證實,包括c-Myc,CyclinD1,AnnexinA2,CamKIIN1和CamKIID等,最后觀察高表達外源annexinA2是否可以減輕SNF5敲低引起的細胞增殖抑制效應。
結果:
我們成功建立了可誘導的SNF5敲低的多發(fā)性骨髓瘤穩(wěn)定細胞系,SNF5敲低明顯抑制骨髓瘤細胞增殖,使細胞阻滯于G1期,并增強了細胞遷移能力;作為表觀遺傳關鍵調控因子,SNF5敲低引起廣泛基因表達譜變化,其中CyclinD
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