糖足方治療糖尿病足作用機(jī)制的實驗研究.pdf

1、研究背景和目的：糖尿病足(DiabetesMeellitusFoot，DF)是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥之一，其發(fā)病率在不斷增長，已成為糖尿病患者致死和致殘的主要原因之一。但迄今為止，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對DF尚缺乏肯定的治療方法。要提高糖尿病患者的生存質(zhì)量和延長生命，就必須尋找治療DF的有效方法。 DF的發(fā)病和糖尿病并發(fā)血管病變、神經(jīng)病變、感染及多種誘因有關(guān)。大量研究表明，對DF的防治就必須重視糖尿病下肢血管動脈粥樣硬化對該病的影響，并有必要

2、對影響動脈粥樣硬化病理關(guān)鍵之一的血管平滑肌細(xì)胞(vascularsmoothmusclecell，VSMC)的增殖以及中醫(yī)藥對此的防治作用機(jī)制進(jìn)行深入的研究。 我們既往的研究提示，益氣養(yǎng)陰，活血化瘀為主的方藥組成對糖尿病足的病情轉(zhuǎn)歸有利，本研究課題從臨床實際出發(fā)，在原有臨床研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行深一步的研究，對亟待解決的跨學(xué)科疑難病癥進(jìn)行基礎(chǔ)研究。用血清藥理學(xué)與現(xiàn)代分子生物學(xué)相結(jié)合的方法，探討中藥復(fù)方制劑對糖尿病大鼠模型血管平滑肌細(xì)胞

3、增殖的抑制作用，進(jìn)而為研究阻止糖尿病下肢動脈粥樣硬化的進(jìn)一步發(fā)展奠定理論基礎(chǔ)。 方法：1.動物血清配制：選擇純種新西蘭家兔，灌服不同劑量的糖足方中藥制劑，制備含有不同藥物濃度的兔血清。2.細(xì)胞培養(yǎng)：用組織塊種植法體外培養(yǎng)糖尿病大鼠模型的髂動脈平滑肌細(xì)胞并用不同濃度含藥血清進(jìn)行干預(yù)。3.同位素液閃測定氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(3H-TDR)摻入量，檢測含藥血清對平滑肌細(xì)胞增殖的影響。4.流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞周期時相。5.對不同濃度

4、含藥血清誘導(dǎo)培養(yǎng)后的平滑肌細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)比較。 結(jié)果：本實驗中糖足方含藥血清諸組呈濃度依賴性地表現(xiàn)為3H-TDR摻入量顯著減少，3個含藥血清組3H-TDR摻入量均明顯低于正常血清對照組(P＜0.01)；各組細(xì)胞計數(shù)與正常血清對照組比較明顯減少(P＜0.01)；流式細(xì)胞儀測定各含藥血清組處于S和G2/M期細(xì)胞百分比顯著低于正常血清組(P＜0.01)。 結(jié)論：1.糖足方含藥血清抑制體外培養(yǎng)糖尿病大鼠VSMC增殖，且抑制效應(yīng)