食管鱗癌中微小RNAlet-7的作用及其對高遷移率蛋白A2的影響.pdf

1、目的：探討食管鱗癌中微小RNA(miRNA)let-7的作用,及其對高遷移率蛋白A2(High mobility groupA2 protein，HMGA2)的調(diào)控影響。
　　 方法：在細(xì)胞水平，應(yīng)用RNA干擾(RNAi)技術(shù)，將let-7及其抑制劑分別轉(zhuǎn)染人食管鱗癌細(xì)胞系Eca109，利用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Quantitative real-time PCR，qRT-PCR)方法分別檢測let-7及HMGA2 mRN

2、A的表達(dá)情況，蛋白印跡(Western blot)檢測HMGA2蛋白的表達(dá)變化；在組織水平，應(yīng)用qRT-PCR方法檢測45例食管鱗癌及其對應(yīng)的癌旁食管組織中l(wèi)et-7和HMGA2 mRNA的表達(dá)情況，同時基于免疫組化技術(shù)檢測150對食管鱗癌組織中HMGA2蛋白的表達(dá)，分析let-7表達(dá)水平與食管鱗癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。
　　 結(jié)果：轉(zhuǎn)染let-7的Eca109細(xì)胞中，let-7表達(dá)水平升高約33%，并且抑制細(xì)胞的增殖，同時HMG

3、A2蛋白的表達(dá)水平下降約30％；轉(zhuǎn)染let-7抑制劑的Eca109細(xì)胞中，let-7表達(dá)水平下降到50%，并且促進(jìn)細(xì)胞的增殖，HMGA2蛋白的表達(dá)水平增加約64％；然而，各組中HMGA2 mRNA水平并未受影響。Let-7在食管鱗癌組織中的表達(dá)顯著低于對應(yīng)的癌旁正常食管鱗狀上皮組織（P＜0.05），其表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)；HMGA2 mRNA水平雖然在癌組織與癌旁組織間無明顯差異（P＞0.05），但其蛋白水平在癌組織中的表達(dá)顯著高于