高遷移率組蛋白-1及其受體在塵肺發(fā)病中的作用.pdf

1、目的:探討高遷移率組蛋白1（high mobility group box protein1 HMGB-1）、可溶性晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（soluble receptor of advanced glycation end-productssRAGE）在煤工塵肺發(fā)病中的作用，研究二氧化硅(SiO2)刺激人支氣管上皮細胞（16 hunman bronchial epithelia,16HBE）對晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(receptoro

2、f advanced glycation end-products RAGE)及配體-鈣粒蛋白(S100)、HMGB-1的影響。
　　 方法:1.選擇西山礦務局接觸煤矽塵20-35年的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期煤矽肺病人作為研究對象，健康對照選擇對象為同一煤礦的未接塵人群。對研究對象行靜脈采血，應用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測量血清中HMGB-1、sRAGE的表達。同時檢測研究對象的肺通氣功能。2.取對數(shù)生長期的16HBE細胞用100μg

3、/mlSiO2刺激培養(yǎng)。實驗分為3組:只加無血清培養(yǎng)液空白對照組;陰性對照組;加入100μg/mlSiO2刺激培養(yǎng)的實驗組，觀察4h、24h、48h，每組設四個平行對照。采用熒光免疫細胞化學技術(shù)測定RAGE、S100的表達;Western blot技術(shù)測定HMGB-1的蛋白含量。
　　 結(jié)果:1.煤工塵肺血清實驗結(jié)果顯示:
　　 1)病例組與健康對照組相比:煤工塵肺患者血清中的sRAGE含量均高于正常對照組，差異有醫(yī)學統(tǒng)

4、計學意義(P＜0.05)，隨著煤工塵肺期別的增高sRAGE表達量增加，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 2) HMGB1在健康對照組與煤工塵肺患者中均有表達，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，在不同的煤工塵肺期別中，HMGB1在Ⅰ、Ⅱ期時表達升高但在Ⅲ期煤工塵肺中出現(xiàn)降低，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 3)肺通氣功能指標FVC、FEV1/FVC、FEV1顯示:隨著煤工塵肺期別的增加，肺通氣

5、量減少，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。肺通氣功能指標FVC、FEV1/FVC、FEV1與煤工塵肺患者血清中HMGB1濃度相關(guān)性分析顯示:HMGB1與肺功能損害在Ⅰ、Ⅱ期煤工塵肺病人中具有一定的平行關(guān)系，通過統(tǒng)計學相關(guān)分析，Ⅰ期煤工塵肺中HMGB1與肺功能FVC、FEV1/FVC、FEV1的相關(guān)系數(shù)分別為-0.764、-0.540、-0.812，(P＜0.05)。Ⅱ期煤工塵肺中HMGB1與肺功能FVC、 FEV1/FVC、FEV1

6、的相關(guān)系數(shù)分別為-0.825、-0.512、-0.843，(P＜0.05)。兩期煤工塵肺中除FEV1/FVC外HMGB1與肺功能均有顯著性的負相關(guān)。
　　 2.SiO2刺激培養(yǎng)16HBE細胞結(jié)果顯示:
　　 1)100μg/mlSiO2實驗組S100含量顯著增加，并隨時間的延長而增加，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義，(P＜0.05)，實驗組S100的表達均高于空白對照組，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義，(P＜0.05)。
　　 2)

7、每個觀察時間點的實驗組RAGE的平均熒光光密度值低于空白對照組，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義，(P＜0.05)，且隨著時間的延長RAGE的表達值降低，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義，(P＜0.05)。
　　 3)實驗組HMGB1的表達均高于空白對照組，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義，(P＜0.05)，隨著時間的延長HMGB1表達量在4h、24h出現(xiàn)增高，但在48h出現(xiàn)降低，差異有醫(yī)學統(tǒng)計學意義，(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:1.sRAGE在正常人

8、及煤工塵肺患者血清中均有表達，與煤工塵肺期別升高而升高并存在時間效應關(guān)系。HMGB1在正常人中有表達，與煤工塵肺病理過程存在密切關(guān)系。職業(yè)性接觸煤矽塵造成肺通氣功能顯著降低，隨煤工塵肺期別的增高，肺通氣功能呈進行性下降。
　　 2.RAGE在正常人支氣管上皮細胞膜上有表達，SiO2的刺激作用可以降低其表達。
　　 3.SiO2能誘導16HBE細胞分泌S100，且隨作用時間的延長，分泌增多。HMGB1在煤工塵肺前期呈進行性