乙醇對肝臟固醇調(diào)節(jié)原件結(jié)合蛋白及其降解機(jī)制的研究.pdf

1、背景：我國近年來由酒精所致的肝損害逐年上升，酒精已成為繼病毒后導(dǎo)致肝損害的第二大病因。典型的酒精性肝病臨床表現(xiàn)為脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纖維化，最終將發(fā)展為不可逆性肝硬化。因此酒精性肝病的防治已經(jīng)成為重要的醫(yī)療課題。國內(nèi)、外關(guān)于酒精性肝病的研究日益增多，但研究熱點(diǎn)大多集中于酒精本身或其代謝產(chǎn)物對肝細(xì)胞的直接毒性作用以及營養(yǎng)失調(diào)、脂質(zhì)代謝異常和脂質(zhì)過氧化等變化在酒精性肝病發(fā)病學(xué)中的作用。肝臟脂質(zhì)代謝紊亂是酒精性脂肪肝的發(fā)病基礎(chǔ)，固醇調(diào)

2、節(jié)元件結(jié)合蛋白(sterol regulatory element-bindingproteins，SREBPs)可以促進(jìn)多種脂質(zhì)合成相關(guān)酶類如乙酰CoA羧化酶(acetylCoA carboxylase,ACC)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)的基因轉(zhuǎn)錄，從而在分子水平調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝。SREBPs在酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)制中的作用尚不完全明確，其降解機(jī)制國內(nèi)外未有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠酒精性脂肪肝模型，研究

3、了SREBPs在大鼠酒精性脂肪肝中表達(dá)及乙醇對其降解機(jī)制，有望對酒精性脂肪肝的進(jìn)一步研究及臨床治療開辟新的途徑。 目的：通過建立大鼠酒精性脂肪肝模型，檢測大鼠血清中甘油三酯(Triglycerides，TG)的含量，分析肝臟中SREBP-1c及其靶基因ACC的表達(dá)，并進(jìn)一步探討乙醇對SREBP-1c降解機(jī)制，測定Fbw7αmRNA、蛋白的含量，以及SREBP-1c的磷酸化及乙酰化水平。 方法：健康雄性成年Wistar大鼠

4、30只，體重(180+10g)，正常喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為2組：正常對照組、酒精性脂肪肝模型組(各15只)。模型組給予酒精灌胃，正常對照組予等量生理鹽水。12周末處死大鼠，GPO-PAP酶法測定血清TG含量， HE染色觀察肝臟病理學(xué)改變，PCR或Western blot檢測大鼠肝內(nèi)ACC、SREBP-1c及Fbw7 α的表達(dá)含量，免疫沉淀分析SREBP-1c的磷酸化及乙?；剑⒏黜?xiàng)與血清內(nèi)TG做相關(guān)性分析。 結(jié)果：酒精性脂肪肝

5、大鼠模型組相比對照組，模型組肝臟出現(xiàn)明顯脂肪變，TG含量明顯升高，SREBP-1c及其靶基因ACC明顯上調(diào)，F(xiàn)bw7 α mRNA及蛋白水平降低，SREBP-1c磷酸化水平明顯低于對照組，但SREBP-1c的乙酰化水平比對照組明顯升高。各項(xiàng)與TG做相關(guān)性分析，SREBP-1c、ACC、SREBP-1c的乙酰化水平均與TG含量呈正相關(guān)，F(xiàn)bw7 α、SREBP-1c磷酸化水平與TG呈負(fù)相關(guān)。 結(jié)論：乙醇增加SREBP-1c及其靶基