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文檔簡介
1、目的:
本文以土茯苓(斷面紅棕色、類白色)為研究對象,通過建立大鼠佐劑性關節(jié)炎(AA)模型,試圖研究土茯苓(斷面紅棕色、類白色)及其黃酮類對類風濕性關節(jié)炎(RA)的預防與治療作用及機制。
為了探討哪種斷面顏色土茯苓抗炎效果更佳,故進行了小鼠毛細管通透性、小鼠棉球肉芽腫及大鼠液體石蠟致炎的抗炎作用比較研究。擬為土茯苓在臨床上預防及治療類風濕性關節(jié)炎及抗炎提供較為可靠的理論基礎及實驗依據(jù)。
方法:
采
2、用SD大鼠,以自制弗氏完全佐劑(FCA)于大鼠足趾皮內注射,建立佐劑性關節(jié)炎(AA)大鼠模型。以大鼠出模率、一般體征、多發(fā)性關節(jié)炎指數(shù)、足爪腫脹度、免疫器官(脾、腎臟及肝臟)重量指數(shù)、HE染色滑膜病理變化、酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中IL-1β的含量及硝酸還原酶法測定血清中NO含量,觀察土茯苓(斷面紅棕色及類白色)及其黃酮類對大鼠AA的預防與治療作用,進行抗AA模型的評價。
采用KM小鼠,以尾靜脈注射伊文思藍,二甲苯涂腹部致炎,以
3、腹部染料的滲出量,進行急性(滲透型)炎癥抗炎作用的評價;以棉球肉芽腫法,進行慢性(增殖型)炎癥抗炎作用的評價;采用SD大鼠液體石蠟致炎實驗對炎性物質NO釋放程度進行評價。
結果:
通過上述藥效學的實驗發(fā)現(xiàn),斷面類白色土茯苓對大鼠AA出模率及多發(fā)性關節(jié)炎指數(shù)有顯著的抑制作用,能顯著降低出模率及血清中NO含量,表明斷面類白色土茯苓對大鼠AA有預防作用;斷面紅棕色土茯苓能抑制大鼠足腫脹度、抑制滑膜增生、炎癥細胞浸潤、降低免
4、疫器官重量,表明斷面紅棕色土茯苓對大鼠AA有治療作用。
其傳統(tǒng)認為黃酮類是土茯苓的有效組分,而在土茯苓黃酮部位的藥效驗證試驗中也首次發(fā)現(xiàn)了黃酮部位并非為土茯苓正確的抗炎有效部位,因研究初步顯示黃酮部位在抗類風濕性關節(jié)炎方面無效,其基本接近模型組。
在二甲苯致小鼠皮膚毛細血管通透性影響試驗中,與空白組比較,各給藥組的伊文思藍滲出量均顯著降低,均能減輕炎性滲出,斷面類白色土茯苓組對伊文斯蘭染料量(OD值)抑制率達到32%
5、(P<0.05),顯示出對二甲苯致小鼠皮膚毛細血管通透性增高具有明顯的抑制作用,故斷面類白色土茯苓組抗急性炎癥(滲透型)作用優(yōu)于斷面紅棕色土茯苓組。在棉球肉芽腫試驗中,與空白組比較,各給藥組的棉球平均重量均低于空白組,差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05),尤其是斷面紅棕色土茯苓低劑量組抑制率最好,達到37%(P<0.05)。通過抗炎作用機理實驗中發(fā)現(xiàn),斷面類白色土茯苓組與斷面紅棕色土茯苓組均能降低大鼠液體石蠟致炎血清中NO含量,這提示對于急
6、性炎癥的抑制作用可能是通過抑制血清中NO的產生來實現(xiàn)的,而斷面類白色土茯苓組抑制率(62%)優(yōu)于斷面紅棕色土茯苓組。
結論:
土茯苓(斷面紅棕色、類白色)藥材在本實驗中有完全不同的藥效學表現(xiàn)。其中斷面紅棕色藥材表現(xiàn)出可顯著抑制增生性的炎癥,減輕滑膜增生、抑制炎癥細胞浸潤、緩解軟骨破壞、抑制足腫脹,對類風濕性關節(jié)炎有顯著的治療作用。而斷面類白色土茯苓對急性滲出型炎癥有顯著抑制作用,能降低血清中NO含量、抑制出模率,對類
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