骨保護(hù)素對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)保護(hù)作用及可能機(jī)制.pdf

1、目的：檢測破骨細(xì)胞分化因子在佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜中表達(dá)的變化，探討其表達(dá)在破骨細(xì)胞活化及關(guān)節(jié)破壞的作用，并探討應(yīng)用骨保護(hù)素對(duì)關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。 方法：用完全弗氏佐劑免疫SD大鼠，誘發(fā)佐劑性關(guān)節(jié)炎，在免疫O、3、7、14、21、30、40天后，立即取下膝關(guān)節(jié)滑膜，采用半定量RT—PCR和免疫組織化學(xué)法檢測大鼠滑膜組織中破骨細(xì)胞(ODF)的表達(dá)，用定量RT-PCR檢測滑膜中破骨細(xì)胞標(biāo)志物：抗酒石酸酸性磷酸酶(TR

2、AP)和組織蛋白酶K(CathepsinK)的表達(dá)的變化，并用TRAP酶組織化學(xué)染色測定滑膜中活化破骨細(xì)胞的數(shù)量，同時(shí)行HE染色觀察關(guān)節(jié)破壞情況。將致炎的關(guān)節(jié)炎大鼠隨機(jī)分為兩組，一組行膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射骨保護(hù)素(OPG)，一組注射IgG,，每一周注射一次，3周后，用半定量RT一PCR檢測兩組大鼠滑膜中TRAP和CathepsinK的表達(dá)情況，用TRAP染色計(jì)數(shù)滑膜中活化破骨細(xì)胞的數(shù)目，HE染色觀察滑漠炎癥、關(guān)節(jié)破壞情況。 結(jié)果：關(guān)節(jié)

3、炎大鼠滑膜中ODF、TRAP、組織蛋白酶K在mRNA水平隨免疫時(shí)間逐漸升高，ODF的表達(dá)水平與TRAP、組織蛋白酶K的表達(dá)水平成正相關(guān)；組化染色顯示，在滑膜的襯里層、滑膜一軟骨交界處有ODF的表達(dá)，且表達(dá)的強(qiáng)度隨免疫時(shí)間逐漸升高，TRAP染色可見在滑膜一軟骨交界處有大量TRAP+細(xì)胞，ODF的表達(dá)強(qiáng)度與!TRAP+細(xì)胞的數(shù)目以及關(guān)節(jié)破壞的程度成正相關(guān)。注射OPG的AA大鼠組關(guān)節(jié)破壞程度上低于注射IgG1的從大鼠組(P

4、P6的從大鼠滑膜中TRAP+細(xì)胞數(shù)目明顯低于注射IgG1的從大鼠組(P<0．01)；注射OP6的從大鼠滑膜中ODF的表達(dá)、炎性細(xì)胞浸潤程度、血管翳數(shù)量與注射IgG。的從大鼠組無顯著性差異(P>0．05) 結(jié)論： 1佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織ODF的表達(dá)隨滑膜炎癥和疾病的嚴(yán)重度而增強(qiáng)，提示ODF可能在關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)破壞病理機(jī)制中起重要作用。 2炎癥滑膜可能通過ODF的表達(dá)而激活滑膜中破骨及前體細(xì)胞，進(jìn)而引起關(guān)節(jié)的破壞