丙酮酸乙酯對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、研究目的：探討丙酮酸乙酯對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)的作用及其部分細(xì)胞分子機(jī)制。 研究方法：(1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分：雄性SD大鼠48只，隨機(jī)分為正常組16只(A組)、模型組16只(B組)、丙酮酸乙酯組16只(C組)。B組、C組采用完全佛氏佐劑造模。C組造模后采用丙酮酸乙酯50mg/kg劑量，每天腹腔注射2次，連續(xù)37天，干預(yù)過程中連續(xù)對(duì)大鼠的一般情況及關(guān)節(jié)炎癥程度進(jìn)行目測(cè)評(píng)分。肉眼觀察足腫脹并進(jìn)行關(guān)節(jié)炎指數(shù)(arthritis ind

2、ex，AI)評(píng)分；組織病理學(xué)對(duì)滑膜炎、放射學(xué)和組織病理學(xué)對(duì)骨質(zhì)破壞進(jìn)行評(píng)分，放射學(xué)評(píng)分采用Larsen評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。第37天處死所有大鼠，心臟采血，ELISA法檢測(cè)血清TNF-α和IL-1β濃度。(2)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)部分：培養(yǎng)原代RA患者成纖維樣滑膜細(xì)胞(fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS)。①分別采用5 Mmol/l、10Mmol/l和20Mmol/lEP干預(yù)FLS，ELISA檢測(cè)上清。②分別采用5Mmol/l、1

3、0Mmol/l和20Mmol/l EP干預(yù)FLS，之后給予TNF-α刺激，ELISA檢測(cè)上清。 結(jié)果：①丙酮酸乙酯對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎的保護(hù)作用：從大鼠出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，丙酮酸乙酯組關(guān)節(jié)腫脹均比模型組輕，造模第28天開始，關(guān)節(jié)炎指數(shù)均低于模型組(P<0.05)；，丙酮酸乙酯組放射學(xué)Larsen評(píng)分與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；丙酮酸乙酯組滑膜炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較輕，關(guān)節(jié)破壞較輕，滑膜炎評(píng)分和關(guān)節(jié)破壞評(píng)分低于模型組(P<0.05)。

4、 ②丙酮酸乙酯組大鼠血清TNF-α和IL-1β水平較模型組明顯降低(P<0.05)，較正常組升高(P<0.05)。 ③丙酮酸乙酯對(duì)滑膜細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響：EP單獨(dú)刺激下，各濃度EP干預(yù)組IL-6濃度與空白對(duì)照組無明顯差異。而在TNF-α刺激下，5 Mmol/l、10Mmol/l和20Mmol/l EP能明顯抑制TNF-α所致成纖維樣滑膜細(xì)胞IL-6的分泌，并且EP對(duì)TNF-α所致IL-6的分泌的抑制作用具有劑量依賴性，其最