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1、1分類號:密級:UDC:學號:406520412368南昌大學碩士研究生學位論文HER2基因?qū)盒阅X膜瘤基因?qū)盒阅X膜瘤IOMMLee細胞株增殖和細胞株增殖和侵襲的影響侵襲的影響EffectofHER2geneonproliferationinvasionofIOMMLeemaligantmeningiomacellline王惟佳培養(yǎng)單位(院、系):南昌大學醫(yī)學院指導(dǎo)教師姓名、職稱:梅金紅教授主任醫(yī)師申請學位的學科門類:醫(yī)學學科專業(yè)名稱
2、:病理學與病理生理學論文答辯日期:2015年6月答辯委員會主席:徐方云評閱人:楊文萍熊麗霞年月日摘要II摘要摘要目的:目的:觀察HER2基因是否影響惡性腦膜瘤細胞的增殖、侵襲,探討HER2是否通過MAPK信號通路發(fā)揮作用。方法:方法:1、通過病毒感染分別將沉默和過表達HER2基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至惡性腦膜瘤IOMMLee細胞株中。實驗分組:第一組:空白組(Blank);第二組:沉默陰性對照組(NCsh);第三組:沉默HER2基因組(HER2sh
3、);第四組:過表達陰性對照組(NCox);第五組:過表達HER2基因組(HER2ox)。使用qPCR和Wersternblot檢測各組細胞HER2mRNA和蛋白表達水平。2、MTT、EdU法檢測各組細胞的生長增殖情況;Transwell小室侵襲法、細胞劃痕實驗法檢測各組細胞侵襲、遷移能力;流式細胞術(shù)檢測各組細胞的細胞周期、凋亡變化。3、Westernblot檢測各組細胞ERK12、PERK12、JNK、PJNK、ERK5、PERK5、P
4、38、PP38、ras蛋白的表達。4、體內(nèi)裸鼠成瘤實驗檢測各組細胞增殖、侵襲的變化。結(jié)果:結(jié)果:1、慢病毒轉(zhuǎn)染成功,HER2在mRNA和蛋白水平達到分組要求。2、沉默HER2組細胞增殖能力減弱,侵襲、遷移能力降低;過表達HER2組細胞增殖能力增強,侵襲、遷移能力提高。HER2基因通過影響細胞周期中的G0G1S的變化而起作用;沉默HER2組腦膜瘤細胞凋亡率增加,過表達HER2組腦膜瘤細胞凋亡率降低。3、沉默和過表達HER2基因可影響惡性腦
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