LC-MS-MS在厄貝沙坦片和格列本脲片Ⅰ期臨床生物等效性研究中的應(yīng)用.pdf

1、目的：本研究旨在通過建立高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）的方法來準(zhǔn)確、快速的測定人體血漿中的厄貝沙坦和格列本脲的藥物濃度，觀察血藥濃度隨時間的變化情況，并估算相應(yīng)藥物制劑的藥代動力學(xué)參數(shù)，以評價試驗藥物在健康人體中是否與參比藥物等效，為四川通園制藥有限公司生產(chǎn)的厄貝沙坦片和咸陽步長制藥有限公司生產(chǎn)的格列本脲片的注冊上市提供可靠的依據(jù)。
　　方法：1、厄貝沙坦片生物等效性的研究：血漿樣品的前處理方法采用的是以甲醇為沉淀劑的

2、蛋白沉淀法，乙腈：0.1％甲酸水溶液(含10mmol/L乙酸銨)=（60：40，v/v）為流動相，色譜柱采用Ultimate C18色譜柱(5μm，2.1×150mm)，采用多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）掃描方式，負(fù)離子檢測方式，以替米沙坦為內(nèi)標(biāo)。進(jìn)樣對所采集的血漿樣品進(jìn)行分析，經(jīng)DAS軟件計算血藥濃度的結(jié)果，求得厄貝沙坦片參比制劑和試驗制劑的主要藥代動力學(xué)參數(shù)，經(jīng)方差分析及雙向單側(cè)t檢驗，評價其生物等效性。2、格列本脲片Ⅰ期臨床的研究：首先，通

3、過對質(zhì)譜和色譜條件以及血漿樣品前處理方法的優(yōu)化，確立本研究所需用的分析測試條件，并對其進(jìn)行方法學(xué)的驗證。22名健康的男性受試者服用2.5mg的格列本脲片受試制劑或參比制劑，分別于給藥前（0h）及給藥后（0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、8、12、24、36h）采集上肢靜脈血5ml，分離血漿用于分析測試。用已建立的方法對所采集的血漿樣品進(jìn)樣分析，用DAS3.2.1對測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，根據(jù)計算出的藥代動力學(xué)參數(shù)，對生

4、物等效性進(jìn)行評價。
　　結(jié)果：1、厄貝沙坦片生物等效性的研究：經(jīng)方法學(xué)驗證結(jié)果顯示，本方法的線性、回收率、精密度、準(zhǔn)確度等均良好，可以用于厄貝沙坦血漿樣本的檢測。方差分析及雙向單側(cè)t檢驗結(jié)果均合格。2、格列本脲片Ⅰ期臨床的研究：Cmax、AUCt、AUCi的[1-2α]％置信區(qū)間分別為81.8％～103.2％、92.1％～100.4％、92.9％～101.4％，Tmax經(jīng)非參數(shù)法檢驗無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：

5、1、厄貝沙坦片生物等效性的研究：四川通園制藥有限公司生產(chǎn)的厄貝沙坦片和賽諾菲（杭州）有限責(zé)任公司生產(chǎn)的厄貝沙坦片具有生物等效性。2、格列本脲片Ⅰ期臨床的研究：本試驗所用的兩種制劑在吸收程度和速率方面均具有生物等效性。
　　本論文的創(chuàng)新之處：1、厄貝沙坦片生物等效性的研究：本試驗所用的血漿樣品的處理方法直接采用蛋白沉淀法，過程簡單、方便且節(jié)省成本。在方法學(xué)的驗證方面與以往的研究相比，增加了絕對基質(zhì)效應(yīng)及殘留效應(yīng)的考察，更加的全面、合