布魯氏菌VirB及GntR在胞內(nèi)生存中的研究.pdf

1、布魯氏菌病是由布氏桿菌(Brucella)這種胞內(nèi)寄生菌引起的一種全球性的人畜共患的傳染性疾病，給全世界人類健康和農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)了巨大的。編碼布魯氏菌毒力因子VirB與調(diào)控因子GntR的基因是布魯氏菌中最為重要的基因之一，在抵御宿主的免疫殺傷作用，并最終建立和維持胞內(nèi)生存過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。但其具體的致病機(jī)制或調(diào)控機(jī)理方面還存在著眾多的疑問(wèn)。為此，深入研究和認(rèn)識(shí)VirB與GntR在布魯氏菌胞內(nèi)感染以及相關(guān)的代謝通路，對(duì)正確揭示布魯氏

2、菌的胞內(nèi)生存機(jī)制、致病機(jī)理方面具有十分重要的作用，為新疫苗和治療藥物研究方面提供了堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)，在布魯氏菌防控工作方面也將起到十分重要的指導(dǎo)意義。
　　 在相關(guān)研究的基礎(chǔ)上，本文主要采用抗性替換的原理來(lái)構(gòu)建VirB與GntR缺失株。本研究以驗(yàn)證后的缺失株16M△virB、16M△gntR為研究材料，對(duì)布魯氏菌毒力表型、布魯氏菌胞內(nèi)環(huán)境適應(yīng)性方面對(duì)其進(jìn)行了相關(guān)的分析，并在相關(guān)毒力研究與分析的基礎(chǔ)上，對(duì)其所相關(guān)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和代謝通路

3、，進(jìn)行了深入的研究。
　　 本研究成功地構(gòu)建了布魯氏菌VirB與GntR的缺失株。virB與gntR基因缺失，virB缺失導(dǎo)致菌株生長(zhǎng)速度減慢，極大地影響了布魯氏菌的生存。體外模擬巨噬細(xì)胞的胞內(nèi)環(huán)境適應(yīng)性分析表明;體外脅迫脅下的應(yīng)激實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)VirB、GntR突變株在多種脅迫環(huán)境中的生存能力均降低，表明VirB，GntR有利于布魯氏菌抵抗各種惡劣環(huán)境。布魯氏菌多種重要基因的轉(zhuǎn)錄學(xué)分析布魯氏菌VirB、GntR在布魯氏菌毒力、體外應(yīng)

4、激以及相關(guān)調(diào)控方面具有十分重要的作用。重要調(diào)控因子GntR在布魯氏菌生物素合成過(guò)程中發(fā)揮了十分重要的作用，是布魯氏菌生物素合成過(guò)程中的主要調(diào)控因子。
　　 以上布魯氏菌毒力、體外適應(yīng)性分析、轉(zhuǎn)錄學(xué)等多種實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:VirB、GntR在布魯氏菌胞內(nèi)生存、毒力的發(fā)揮以及代謝通路網(wǎng)絡(luò)方面居于十分關(guān)鍵的的位置，在布魯氏菌的致病機(jī)理和感染建立方面發(fā)揮了十分重要的作用。本課題就VirB及GntR兩種重要的毒力（調(diào)控）因子布魯氏菌在宿主機(jī)體