外源性bFGF治療兔下肢慢性缺血的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：再生治療是血管閉塞性疾病的新療法。本研究目的在探討bFGF生長(zhǎng)因子治療兔模型缺血后肢的劑量關(guān)系。通過(guò)對(duì)48只兔下肢缺血模型的形態(tài)學(xué)觀察、DSA計(jì)數(shù)側(cè)支血管數(shù)、微血管密度檢測(cè)以及微血管/肌纖維束比值的測(cè)定，來(lái)評(píng)價(jià)不同劑量bFGF治療兔后肢缺血有效性，篩選：通過(guò)肝、腎功能檢測(cè)、動(dòng)脈造影和病理學(xué)觀察，評(píng)價(jià)不同劑量的bFGF治療兔后肢缺血的安全性；bFGF治療兔下肢缺血最佳的劑量。
　　 方法：48名兔被用來(lái)建構(gòu)左股動(dòng)脈切除缺血后

2、肢的模型。對(duì)于血管再生法，堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)被分成3組于左股動(dòng)脈處輸注。實(shí)驗(yàn)兔分為4組，根據(jù)不同的輸注方法。隨機(jī)分組，各組12只，分組如下：A組：注射5mlTris緩沖液/只；B組：注射rh-bFGF5ug+5ml Tris緩沖液/只；C組：注射rh-bFGF10ug+5ml Tris緩沖液/只；D組：注射rh-bFGF20ugg+5ml Tris緩沖液/只。四個(gè)處理組分別在藥前、給藥后10天、給藥后20天進(jìn)行三項(xiàng)的試驗(yàn)

3、檢查：一是靜脈血檢測(cè)肝、腎功能檢測(cè)；二是采用DSA技術(shù)觀察肢體側(cè)支血管形成；三是采用毛細(xì)血管密度、微血管機(jī)纖維束比值檢測(cè)及病理學(xué)觀察
　　 結(jié)果：⑴形態(tài)學(xué)觀察：30天后，各處理組動(dòng)物均無(wú)死亡。動(dòng)物模型制作成功后10天內(nèi)動(dòng)物下肢有不同程度缺血表現(xiàn)：跋行，缺血肢體毛發(fā)稀疏、顏色暗紅等。模型成功制作10天以后：A組缺血癥狀持續(xù)存在，跋行逐漸加重，1例出現(xiàn)足趾潰瘍壞疽，缺血癥狀最嚴(yán)重，B、C、D組用藥后跋行逐漸緩解，手術(shù)創(chuàng)口愈合較對(duì)照組

4、良好，無(wú)下肢潰瘍壞疽。⑵下肢動(dòng)脈造影：DSA影像示：對(duì)照組兔的肢體切口處沒(méi)有產(chǎn)生新生的血管。其他三個(gè)處理組有注射bFGF后，血管造影可見(jiàn)到血管“橋”和“網(wǎng)”的大量的形成，在結(jié)扎點(diǎn)的髂外動(dòng)脈周?chē)性S多血管“網(wǎng)”和血管“橋”，使髂外動(dòng)脈與股動(dòng)脈血流通暢無(wú)阻，結(jié)扎點(diǎn)下方的股動(dòng)脈血管變粗，血管充盈，使缺血損傷的股動(dòng)脈的血管功能恢復(fù)，骨骼肌內(nèi)、外側(cè)有大量小血管形成。⑶微血管密度和微血管/肌纖維束比值：治療組微血管密度和微血管/肌纖維束比值較對(duì)照組

5、明顯增高(P<0.01)。⑷病理觀察：結(jié)扎股動(dòng)脈后只予以空白處理兔的患肢肌肉中出現(xiàn)有肌纖維變細(xì)、斷裂或某些肌束中有缺失肌組織以及脂肪組織浸潤(rùn)的現(xiàn)象，而在bFGF處理組肌束中則少見(jiàn)這種現(xiàn)象。⑸血肝、腎功能檢測(cè)：各組給藥前、給藥后10天、給藥后20天抽取靜脈血檢測(cè)血ALT、AST、BLJN、Cr，各組內(nèi)不同時(shí)間各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 結(jié)論：①rh-bFGF可有效促進(jìn)兔缺血肢體血管新生、側(cè)支循環(huán)建立