黃麻組培再生和胚性懸浮細(xì)胞體系構(gòu)建的研究.pdf

1、黃麻，為椴樹(shù)科黃麻屬一年生草本韌皮纖維作物，是世界上最重要的纖維作物之一。其主要的栽培品種有：“圓果種”（Corchorus capsularisL.）和“長(zhǎng)果種”（Corchorus olitoriusL.）。由于黃麻具有纖維產(chǎn)量高、質(zhì)地柔軟、吸濕性能好等諸多優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于商業(yè)、工業(yè)和建筑業(yè)領(lǐng)域。因此黃麻的組織培養(yǎng)技術(shù)的研究也愈發(fā)重要，通過(guò)組織培養(yǎng)，獲得優(yōu)質(zhì)的材料，為黃麻的綜合利用提供參考。本試驗(yàn)以黃麻為試驗(yàn)材料，采用黃麻組培苗的幼

2、莖為外植體，誘導(dǎo)胚性愈傷組織，建立植株再生體系和胚性懸浮細(xì)胞體系。通過(guò)本試驗(yàn)的研究，獲得如下的結(jié)果：
　　1、黃麻組培再生體系的研究
　?。?）為了篩選黃麻愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，試驗(yàn)選用黃麻圓果種和長(zhǎng)果種各兩個(gè)品種為試驗(yàn)材料，以黃麻組培苗的幼莖為外植體，利用均勻設(shè)計(jì)法對(duì)圓果種和長(zhǎng)果種進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)。試驗(yàn)結(jié)果表明，愈傷組織的誘導(dǎo)效果為黃麻179>梅峰四號(hào)>龍溪長(zhǎng)果>廣巴矮。其中黃麻179的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+0.53 m

3、g/L2,4-D+2.0 mg/L6-BA。梅峰四號(hào)的愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為：MS+2.0 mg/L TDZ+0.5 mg/L2,4-D。龍溪長(zhǎng)果的愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為：MS+2.0 mg/L TDZ+2.0 mg/L6-BA。廣巴矮的愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為：MS+2.0mg/L TDZ+2.0 mg/L2,4-D+2.0 mg/L6-BA。
　?。?）選用生長(zhǎng)良好的四種基因型黃麻愈傷組織為外植體材料，采用正交設(shè)計(jì)法對(duì)不定芽和不

4、定根進(jìn)行誘導(dǎo)，在誘導(dǎo)過(guò)程中，研究基因型和激素組合的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，四個(gè)品種的黃麻愈傷組織的再生能力差異顯著，誘導(dǎo)效果為黃麻179>梅峰四號(hào)>龍溪長(zhǎng)果>廣巴矮。黃麻179和梅峰四號(hào)獲得再生植株，龍溪長(zhǎng)果誘導(dǎo)出不定根，廣巴矮只誘導(dǎo)出不定芽。長(zhǎng)果種黃麻再生能力差，再生率低。激素組合對(duì)黃麻愈傷組織的影響同樣顯著，黃麻179和梅峰四號(hào)在MS+1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+1.5 g/L Vc誘導(dǎo)出不定芽，在MS+2.0

5、mg/L NAA+0.5 mg/L（1.0 mg/L）IBA誘導(dǎo)不定根，獲得再生植株，且長(zhǎng)勢(shì)良好。龍溪長(zhǎng)果的不定芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為：MS+1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+1.5 g/L，誘導(dǎo)率為22.6％。
　　2、黃麻胚性細(xì)胞懸浮系的研究
　　(1)選用生長(zhǎng)良好的圓果種黃麻愈傷組織為材料，利用不同激素組合對(duì)胚性愈傷組織進(jìn)行誘導(dǎo)，在誘導(dǎo)過(guò)程研究了基因型和激素組合的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，黃麻179愈傷組織向

6、胚性愈傷組織的轉(zhuǎn)變比梅峰四號(hào)容易，胚性愈傷組織質(zhì)量好且誘導(dǎo)時(shí)間短。兩個(gè)品種的黃麻愈傷組織在MS+0.1mg/L TDZ+0.3 mg/L6-BA+0.3 mg/L NAA上的誘導(dǎo)效果最好，誘導(dǎo)率分別為54.62%和43.88%。
　　(2)利用生長(zhǎng)良好的胚性愈傷組織為試驗(yàn)材料構(gòu)建懸浮細(xì)胞系，研究培養(yǎng)基、接種量、裝液量、pH、基因型的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，黃麻胚性愈傷組織在 B5培養(yǎng)基，裝液量40mL,接種量1.0 mL時(shí)可成功獲得細(xì)