水稻不同品種組培再生和轉(zhuǎn)基因頻率研究.pdf

1、水稻既是世界上的主要糧食作物之一，也是科學(xué)研究的一種模式生物。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的飛速發(fā)展不僅對(duì)水稻的轉(zhuǎn)基因育種產(chǎn)生了深遠(yuǎn)影響，也促進(jìn)水稻功能基因組學(xué)的發(fā)展。但是，目前成熟的水稻轉(zhuǎn)基因技術(shù)僅局限于少數(shù)常規(guī)粳稻品種，秈稻的基因轉(zhuǎn)化仍然進(jìn)展緩慢，因而對(duì)一些重要的水稻品種進(jìn)行組織培養(yǎng)能力和基因轉(zhuǎn)化效率的考察將會(huì)大大促進(jìn)水稻轉(zhuǎn)基因育種的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展。本研究選取了21個(gè)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上具有重要價(jià)值的水稻品種，通過(guò)對(duì)它們成熟胚的組培再生能力以及轉(zhuǎn)基因效率的考察，發(fā)

2、現(xiàn)這些水稻品種間再生能力和轉(zhuǎn)基因效率均存在顯著差異，并且受到愈傷日齡和培養(yǎng)基組成成分的重大影響。具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　 1.不同水稻品種成熟胚組培再生能力考察:(1)通過(guò)對(duì)21份水稻品種成熟胚的愈傷誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)不同水稻品種之間愈傷誘導(dǎo)率(CIR，％)存在較大差異（普遍介于25％和70％之間）;(2)對(duì)這些材料的愈傷進(jìn)行連續(xù)繼代培養(yǎng)后，觀察發(fā)現(xiàn)基因型不同，愈傷的形態(tài)特征和增殖能力等方面出現(xiàn)明顯區(qū)別;(3)采用兩種分化培養(yǎng)

3、基（NBm和DL3），分別選取日齡為15天、25天、35天的各材料愈傷進(jìn)行植株再生培養(yǎng)，并以單粒愈傷平均出苗數(shù)(NRS)和植株再生率（RR）進(jìn)行再生能力的考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，植株再生能力與基因型和接種愈傷日齡均有密切關(guān)系，同時(shí)發(fā)現(xiàn)DL3分化培養(yǎng)基更適于大部分秈稻材料，而NBm分化培養(yǎng)基較有利于粳稻的分化。
　　 2.不同水稻品種基因轉(zhuǎn)化能力的考察:利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法對(duì)選取的14個(gè)水稻品種的愈傷進(jìn)行Bt基因的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，并對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因植