MDS患者骨髓異?？寺〖?xì)胞起源的初步研究.pdf

1、目的：探討骨髓增生異常綜合征(MDS)患者骨髓異常克隆細(xì)胞的起源，即MDS患者骨髓CD34+CD38-造血干細(xì)胞和CD34+CD38+祖細(xì)胞中是否存在惡性克隆細(xì)胞及惡性克隆所占的比例；并研究CD34+CD38-造血干細(xì)胞和CD34+CD38+祖細(xì)胞長期培養(yǎng)形成集落的情況。
　　 方法：1、用免疫磁珠分選技術(shù)(MACS)分選11例染色體異常的MDS患者(其中單一8號(hào)染色體三體4例，含有8號(hào)染色體三體的復(fù)雜核型2例，單一5q-2例，

2、含有5q-的復(fù)雜核型2例，5q-合并8號(hào)染色體三體1例)的骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMNC)中的CD34+CD38-細(xì)胞和CD34+CD38+細(xì)胞，分別制成涂片；將上述11例患者的骨髓液溶血得到骨髓有核細(xì)胞并甩片備FISH。然后在上述涂片上通過熒光原位雜交(FISH)方法比較CD34+CD38-、CD34+CD38+和骨髓有核細(xì)胞這三群細(xì)胞中異?？寺〖?xì)胞的百分比。2、對(duì)其中2例8三體患者的CD34+CD38-造血干細(xì)胞和CD34+CD38+祖細(xì)

3、胞分別長期培養(yǎng)(LTC)6周后，接種到甲基纖維素完全培養(yǎng)基中進(jìn)行分化培養(yǎng)，14天后觀察是否有細(xì)胞集落形成。如果有集落形成則分析集落的克隆來源。
　　 結(jié)果：1、這兩群細(xì)胞在5q-和8號(hào)染色體三體的MDS患者中均有惡性克隆的累及，但是CD34+CD38-干細(xì)胞中惡性克隆細(xì)胞的比例(46.3±8.1)％低于CD34+CD38+祖細(xì)胞中的惡性克隆細(xì)胞比例(75.9±6.8)％，p<0.001；惡性克隆比例在CD34+CD38+祖細(xì)胞與