黃芩苷對香煙煙氣提取物誘導(dǎo)細胞損傷的保護作用研究.pdf

1、目的：采用自主制備的煙氣提取物(cigarettesmokeextract,CSE)研究其細胞毒性,并探討黃芩苷對香煙煙氣提取物引起的人肺泡上皮細胞損傷的作用,為下一步開發(fā)添加植物提取物的減毒藥煙提供一定實驗依據(jù)。
　　 材料與方法：培養(yǎng)人肺泡上皮細胞A549,自主制備香煙煙氣提取物(CSE),確定相關(guān)的實驗條件,用黃芩苷預(yù)處理細胞后,再用CSE刺激細胞,用MTT實驗檢測細胞存活率,流式細胞術(shù)測定細胞凋亡率,彗星實驗觀察DNA損

2、傷,熒光法測定細胞內(nèi)活性氧(ROS)含量以觀測黃芩苷對煙氣的細胞毒保護作用。
　　 結(jié)果：1、確定實驗條件:1％濃度的DMSO在實驗時間內(nèi)(12h,24h,36h)肺泡上皮細胞的存活率與對照組相比沒有差異;試驗用黃芩苷濃度(5mg/L,10mg/L,20mg/L,40mg/L)在24h內(nèi)肺泡上皮細胞的存活率與對照組相比較沒有統(tǒng)計學(xué)差異;隨著CSE濃度的增加和作用時間的延長,細胞存活率下降,各組之間有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),短

3、時間實驗條件下,50％CSE細胞存活率能滿足實驗要求。2、50％CSE刺激細胞可以起細胞存活率下降、細胞內(nèi)活性氧含量升高、細胞凋亡率及DNA損傷增加;用黃芩苷預(yù)處理后這種損傷作用明顯降低,與陽性對照組之間差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1、本研究采用的提取物制備條件及細胞染毒條件適用于香煙煙氣的細胞毒性研究。2、黃芩苷可以拮抗香煙煙氣提取物引起的細胞損傷,提高細胞的存活率,降低凋亡率,其原因可能與黃芩苷能降低細胞內(nèi)活