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文檔簡介
1、目的:氣道上皮是肺部抵御外界理化因素刺激的第一道防線。病原微生物、外界有害的微塵顆粒、氣體等因素導(dǎo)致氣道上皮損傷是慢性阻塞性肺疾病(COPD)的起始環(huán)節(jié)和病理基礎(chǔ)。吸煙是引起COPD的重要危險(xiǎn)因素。吸煙與。MMP-9、IL-8引起COPD的關(guān)系日益受到重視。分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制物(SLPI)是氣道重要的保護(hù)基質(zhì)。通過本實(shí)驗(yàn)來檢測香煙煙霧提取物(CSE)對正常人支氣管上皮(NHBE)細(xì)胞MMP-9和IL-8表達(dá)水平的影響;并觀測加入SL
2、PI對上述因素的調(diào)控作用。探討SLPI對慢性氣道炎癥疾病保護(hù)作用的部分機(jī)制,為COPD的臨床治療尋求更多的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:實(shí)驗(yàn)分四組:對照組,CSE組,SLPI組,SLPI+CSE組。體外培育M/BE細(xì)胞分別給予CSE及SLPI干預(yù)處理,采用ELISA法檢測NHBE細(xì)胞上清液IL-8的表達(dá);免疫細(xì)胞化學(xué)方法(sP法)檢測NHBE細(xì)胞MMP-9蛋白的表達(dá)及RT-PCR法和圖像分析檢測NHBE細(xì)胞MMP-9mRNA的表達(dá)。
3、 結(jié)果:1對照組NHBE細(xì)胞有少量MMP-9、IL-8的表達(dá)。2 CSE組MMP-9、IL-8的表達(dá)明顯高于對照組、SLPI+CSE組、SLPI組。CSE干預(yù)NHBE細(xì)胞不同時(shí)間證實(shí),其誘導(dǎo)MMP-9、IL-8表達(dá)的作用在一定范圍內(nèi)與干預(yù)時(shí)間呈依賴關(guān)系,24小時(shí)達(dá)高峰,隨后呈下降趨勢(P<0.05)。3 SLPI組MMP-9、IL-8的表達(dá)水平明顯低于對照組(P<0.05)。SLPI抑制MMP-9、IL-8表達(dá)的效應(yīng)在一定范圍內(nèi)與濃度呈
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