葡萄籽提取物對(duì)肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：1)研究噴霧干燥方法對(duì)葡萄籽提取物(grape seed extracts，GSE)抗氧化活性的影響；2)研究GSE對(duì)CCl<,4>所致小鼠急性化學(xué)性肝損傷和卡介苗(BCG)聯(lián)合脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用。方法：1)篩選新疆某葡萄酒廠酒渣中的葡萄籽，用石油醚完全脫脂，乙醇回流提取，提取液減壓濃縮后，濃縮液分別采用噴霧干燥和自然干燥兩種方法干燥得浸膏粉。通過(guò)比較兩種干燥方法所得浸膏粉的抗氧化活性一包括還原能力，清

2、除DPPH自由基和羥自由基能力，研究不同干燥方法對(duì)葡萄籽提取物抗氧化活性的影響；2)CCl<,4>所致急性化學(xué)性肝損傷動(dòng)物模型的復(fù)制及劑量分組：取雄性昆明種小鼠60只，隨機(jī)分成6組，每組10只，即正常對(duì)照組、模型組、GSE低劑量組、GSE中劑量組、GSE高劑量組、聯(lián)苯雙酯組。每日上午，除正常對(duì)照組灌胃給予植物油0.2mL/10g以外，其余各組灌胃給予2％CCl<,4>油溶液0.2mL/10g。下午各實(shí)驗(yàn)組組按(50、250、500mg/

3、kg)的劑量灌胃給予噴霧干燥法所干燥的葡萄籽提取物，空白對(duì)照組和模型組均灌胃給予等量生理鹽水，連續(xù)10d；BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)免疫性肝損傷動(dòng)物模型的復(fù)制及劑量分組：取雄性昆明種小鼠72只，隨機(jī)分成6組，每組12只，即正常對(duì)照組、模型組、GSE低劑量組、GSE中劑量組、GSE高劑量組、聯(lián)苯雙酯組。實(shí)驗(yàn)正式開始第一天，除正常對(duì)照組尾靜脈注射生理鹽水0.2ml外，其余小鼠均經(jīng)尾靜脈注射BCG 0.2ml(含5×10<'7>個(gè)活菌)的生理鹽水懸

4、液。次日起各實(shí)驗(yàn)組按(50、250、500mg/kg)的劑量灌胃給予噴霧干燥法所干燥的葡萄籽提取物。連續(xù)12d，末次灌胃1h后，各干預(yù)組小鼠均經(jīng)尾靜脈注射LPS生理鹽水溶液7.5μg/只，正常對(duì)照組尾靜脈注射等容量的生理鹽水。3)指標(biāo)測(cè)定：CCl<,4>所致急性化學(xué)性肝損傷動(dòng)物和BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)免疫性肝損傷動(dòng)物分別在末次給藥后10h、12h摘眼球取血，測(cè)定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)含量，摘取肝臟

5、、脾臟，稱重，分別計(jì)算肝臟、脾臟系數(shù)：測(cè)定肝組織超氧化物歧化酶(SOD)含量、丙二醛(MDA)的含量，并觀察肝臟病理組織學(xué)變化。結(jié)果：1)噴霧干燥所得葡萄籽提取物的抗氧化活性影響較自然干燥所得產(chǎn)物強(qiáng)；2)GSE各劑量組均能使CCl<,4>所致小鼠急性化學(xué)性肝損傷小鼠肝組織MDA含量降低(P<0.01)；使肝組織SOD活性升高(P<0.01)；能明顯降低小鼠血清ALT、AST的活性(P<0.01)；并能不同程度地改善肝臟組織病理性損傷。G

6、SE各劑量組均可降低BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)免疫性肝損傷動(dòng)物的肝臟系數(shù)和脾臟系數(shù)(P<0.01)；并降低肝組織MDA含量(P<0.01)；升高肝組織SOD活性(P<0.01)；GSE中、高劑量組可明顯降低小鼠血清ALT、AST的活性(P<0.05)；并能不同程度地改善肝臟組織病理性損傷。結(jié)論：1)噴霧干燥法對(duì)GSE抗氧化活性影響很小，適用于工業(yè)生產(chǎn)；2)GSE對(duì)CCl<,4>所致急性化學(xué)性肝損傷和BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)的免疫性肝損傷均有一定的