元胡止痛方腸吸收液的成分分析及血管活性評價.pdf

1、目的：中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究是中藥研究的難點和關(guān)鍵點，在多數(shù)的情況下，中藥的有效成分發(fā)揮藥效作用，需要被吸收入血、到達(dá)靶器官并且作用于相應(yīng)的靶點之后才可以實現(xiàn)(在腸道直接發(fā)揮作用和調(diào)節(jié)腸道菌群的藥物除外)。腸吸收是藥物發(fā)揮作用的前提，對腸吸收液進(jìn)行活性評價是辨識有效成分的新策略。本研究以元胡止痛方為研究對象，通過對元胡止痛方腸吸收成分、入血成分以及血管活性相關(guān)研究，試圖確定該方與血管活性有關(guān)的主要成分。
　　 方法：本研究通過正交

2、試驗優(yōu)化延胡索和白芷合提的熱回流提取工藝，該提取工藝對元胡止痛方的主要指標(biāo)成分的提取效率比較高；通過外翻腸囊法進(jìn)行元胡止痛方提取物腸吸收試驗，并通過HPLC建立了同時測定元胡止痛方腸吸收液中延胡索乙素等8個主要成分的含量測定方法，然后對不同時間點的腸吸收液進(jìn)行定量分析，并進(jìn)一步用LC-MS對其它成分進(jìn)行定性分析；再次，通過大鼠胸主動脈環(huán)模型離體試驗，對不同時間點元胡止痛方腸吸收液的進(jìn)行血管舒張活性評價，闡釋藥物吸收動力學(xué)與藥效活性之間的

3、關(guān)聯(lián)性；最后，通過LC-ESI-MS對灌胃給予元胡止痛方提取物大鼠血漿樣品的分析，對入血成分進(jìn)行定性分析，研究被腸吸收的主要成分能否在血漿中檢測到，從而研究體外腸吸收試驗與體內(nèi)過程的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：綜合考慮成本和提取效率，元胡止痛方乙醇熱回流法最佳提取提取工藝為：4倍量70％乙醇提取2次，每次2h；通過HPLC，建立同時測定元胡止痛方的提取物腸吸收液中原阿片堿、α-別隱品堿、鹽酸黃連堿、白當(dāng)歸素、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿、延

4、胡索乙素、歐前胡素8個成分定量分析方法，并測定不同時間點腸吸收液中的含量，獲得時間-濃度曲線，初步分析8個成分的吸收機(jī)制；離體血管實驗證實元胡止痛方的腸吸收液具有血管活性，并且隨著吸收時間的延長其血管活性有較明顯的增強(qiáng)；通過LC-MS分析大鼠給藥后不同時間點的血漿樣品，在0.5h、1h、2h、4h共檢測到延胡索乙素、α-別隱品堿、紫堇堿、氧化前胡素、歐前胡素、黃連堿、異歐前胡素、小檗堿、四氫小檗堿、東莨菪內(nèi)酯、白當(dāng)歸素、白當(dāng)歸腦、原阿片