構(gòu)樹葉活性成分分析及抑菌作用研究.pdf

1、目的：我國是世界上植物資源最為豐富的國家之一，但我國中藥的貿(mào)易，在市場上僅占較小的份額。因此，大力推進(jìn)中藥資源的現(xiàn)代開發(fā)研究，不僅包括應(yīng)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)進(jìn)行資源規(guī)劃、活性成分提取分析、效用評(píng)價(jià)等，以研發(fā)出新的產(chǎn)品；還包括開發(fā)出天然防腐劑及化妝品等，以較好的利用我國的植物資源。本研究是從構(gòu)樹葉中提取活性成分，對(duì)其活性成分用高效液相色譜測定，探討對(duì)淺部真菌作用效果和用作天然的食品防腐劑的效果，以便合理的開發(fā)利用我國的構(gòu)樹資源。 方法：

2、采于湖北黃岡的構(gòu)樹葉經(jīng)日照曬干，用75％乙醇提取24h，共3次，收集混合液。（1）對(duì)收集的混合液，經(jīng)石油醚萃取、水解、過濾等方法，用高效液相色譜測定其黃酮類化合物。（2）對(duì)收集的混合液，經(jīng)醇?jí)A皂化、石油醚萃?。ǔルs質(zhì)）、減壓濃縮、層析分離、過濾等手段，用高效液相色譜測定輔酶Q10。（3）對(duì)構(gòu)樹葉中提取物用平皿藥基法進(jìn)行對(duì)紅色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌、絮狀表皮癬菌和白色念珠菌的抗真菌試驗(yàn)。（4）對(duì)構(gòu)樹葉中提取物添加到生醬油中，并進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照

3、與空白對(duì)照，定性與定量觀察防腐效果，并進(jìn)行了一次加菌28天的微生物挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果：(1) 經(jīng)高效液相色譜測定，構(gòu)樹葉中含有的黃酮類化合物分別是槲皮素、異甘草素、胡蘿卜苷。1.0Kg構(gòu)樹葉中含有的黃酮類化合物其含量分別是6.51g，7.06g，1.74g；其總黃酮含量為15.31g。槲皮素、異甘草素、胡蘿卜苷分別在3.1～25.0μg/mL,2.5～50.0μg/mL，2.5～50.0μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，平均加

4、樣回收率(以槲皮素計(jì)）為99.91％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.91％（n=6）。(2) 1.0kg構(gòu)樹提取物中輔酶Q10的平均含量為0.66g。輔酶Q10在4.0～64.0μg/ml(r=0.9997)范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。平均加樣回收率為98.66％，RSD為0.97％（n=6）。構(gòu)樹葉中輔酶Q10的最低檢測限為10ng/ml（S/N=3）。(3) 通過對(duì)紅色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌、絮狀表皮癬菌和白色念珠菌的抑菌試驗(yàn)表明，構(gòu)樹葉提

5、取物具有較好的抗真菌作用，體外抗淺部真菌試驗(yàn)均表明構(gòu)樹葉不同溶劑提取物具有明顯的抗真菌作用，其提取物的最低抑菌濃度低于目前公認(rèn)的抗真菌中藥的最低抑菌濃度。（4）構(gòu)樹葉提取物中的活性成分黃酮類化合物具有較強(qiáng)的防腐效果。在37℃和室溫下培養(yǎng)2周，0.5％濃度及以上均可抑制細(xì)菌和霉菌生長；在微生物挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)中，1.0％濃度的構(gòu)樹葉提取物就可通過微生物挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)，其效果優(yōu)于濃度為0.1％的苯甲酸鈉。從以上結(jié)果可以得出，構(gòu)樹葉提取物中的活性成分黃

6、酮類化合物具有很好的抑菌和防腐效果。 結(jié)論：高效液相色譜法測定黃酮類化合物和輔酶Q10靈敏，快速，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于構(gòu)樹葉提取物中黃酮類化合物和輔酶Q10的分析。通過初步抑菌和防腐試驗(yàn)表明，構(gòu)樹葉提取物中活性成分黃酮類化合物具有一定的抗淺部真菌作用和防腐效果，為進(jìn)一步開發(fā)與利用我國的植物資源打下基礎(chǔ)。構(gòu)樹葉資源豐富，提示可作為廣譜抗淺部真菌中草藥，以冀開發(fā)出新的抗真菌中藥；且構(gòu)樹葉提取物中的黃酮類化合物可作為一種食品的天然防腐劑，