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文檔簡介
1、目的:觀察養(yǎng)精膠囊是否通過上調(diào)POU3F1促進GC-1細胞的增殖,并探討其具體的信號通路機制。
方法:以體外小鼠精原細胞系GC-1細胞培養(yǎng)為模型,用無血清培養(yǎng)液誘導GC-1細胞凋亡,繼而加入養(yǎng)精膠囊提取液(0.01,0.1,1 mg/mL)作用48小時后,用MTT法檢測細胞的活性;實時熒光定量PCR法和Western blot法檢測POU3F1的mRNA和蛋白質(zhì)的表達;利用POU3F1 siRNA,GFRα1 siRNA和LY
2、294002分別阻斷GDNF-PI3K/Akt-POU3F1通路的上下游,探究其作用機制。
結(jié)果:養(yǎng)精膠囊提取液加入GC-1細胞后,能夠顯著增加細胞的活力,POU3F1的mRNA和蛋白質(zhì)的表達水平增加;使用POU3F1 siRNA,GFRα1 siRNA和LY294002處理后,明顯抑制了養(yǎng)精膠囊提取液對GC-1細胞的增殖,降低了養(yǎng)精膠囊提取液對POU3F1的mRNA和蛋白質(zhì)的表達。
結(jié)論:養(yǎng)精膠囊提取液能促進GC-
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